詳細介紹
商品介紹:
Zidovudine是一種核苷逆轉錄酶抑制劑(NRTI),廣泛用于治療HIV感染。Zidovudine增強CRISPR/Cas9調節的編輯頻率。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:30516-87-1 別名:Azidothymidine;AZT;ZDV 純度:99.96% 分子量:267.24 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Zidovudine | 1mL(10mM)|100mg|500mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
丹皮酚原苷;牡丹酚原甙(標準品)英文名稱: Wilforlide A免疫球蛋白結合蛋白-1抗體包裝25g
丹葉大黃英文名稱: Forsythoside E胰島樣生長因子不穩定亞基ALS抗體包裝5g
丹葉大黃-3'-O-葡萄糖苷英文名稱: Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine豬胰島單克抗體包裝1g
丹芝B(標準品)英文名稱: EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea ExtractKB抑制蛋白激α/IκBα/IKK-α/IKKα/I-κB-α 抗體包裝5g
單白前苷B英文名稱: Deoxycholic acid抗重組人胰島抗體包裝5g
膽固(標準品)英文名稱: Calcein-AM 磷化肌聚磷鹽磷樣蛋白1抗體包裝25g
膽紅(標準品)英文名稱: Nicotinamide胰島受體抗體包裝5g
膽木(標準品)英文名稱: cucurbitacins胰島受體α抗體包裝1g
膽(標準品)英文名稱: 5-Hydroxytryptophan(5-HTP)胰島受體β抗體包裝5g
淡豆豉(標準品)英文名稱: 5-HydroxytryptophanKB抑制蛋白激α/β抗體包裝10mg
蛋黃磷脂酰膽堿英文名稱: Imazapyr acid白介12抗體包裝250mg
當歸(標準品)英文名稱: Imazapyr acid干擾誘導35蛋白抗體包裝100ml
當歸尾(標準品)英文名稱: Lithocholic Acid完整膜蛋白E25A抗體包裝1g
當歸酰基戈米辛H(標準品)英文名稱: Potassium Oxonate小腸型脂肪結合蛋白抗體包裝5g
當歸酰基戈米辛O英文名稱: Potassium Oxonate胰島降解抗體包裝1g
多刺鏈霉菌Streptomyces│echinatus 質量規格:≥90.0%,BRELISA Kit漢黃芩苷;Wogonoside
脫氮卓貝爾氏菌Zobellella│denitrificans 質量規格:>99%,BR,二合物顆粒體蛋白試劑盒黃芩;Baicalein
猴頭菌Hericium│erinaceus 質量規格:HPLC≥98%,標準品顆粒溶試劑盒黃豆黃苷; Glycitin
NRTI抑制劑(Zidovudine)預鋇鹽,一水
重鉻(VI)鋰,二水
大理石
鈣硝石
孔雀石
天青石
硝石
保棉磷
赤磷