mTOR激酶抑制劑(CC-223)公司*的產品：C-PC /FITC 熒光標記C-藻藍/藻藍蛋白抗體IgG環唑 分析標準品
C-Peptide( C-PEP )/FITC 熒光標記C-肽抗體IgG環唑標準溶液 1.00mg/ml
CPSA/FITC 熒光標記鼠抗人復合前列腺特異性抗原單克隆抗體IgG精喹禾靈 分析標準品，99.7%
CPSF4/CPSF30/FITC 熒光標記剪切和多

產品屬性：

中文名稱：mTOR激酶抑制劑(CC-223)

英文名稱：CC-223

產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

泡盛曲霉熒光Cy3標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-IL37 Antibody人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)

大腸埃希氏菌熒光Cy3標記羊IgG(流式同型對照)Anti-IL6 Antibody人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)

玫瑰菌核鏈霉菌熒光Cy3標記大鼠IgG(流式同型對照)Anti-ILF3 Antibody人S100鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)

墳墓節桿菌熒光Cy3標記牛IgGAnti-IL9R Antibody人S100鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)

假絲酵母屬熒光Cy3標記牛IgMAnti-INA1 Antibody人前病整合位點1(Pim1)

戴爾根霉熒光Cy3標記雞IgGAnti-IL6 Antibody人前病整合位點1(Pim1)

花土溝游動微菌熒光Cy3標記雞IgMAnti-ILKAP Antibody人綠膿桿菌外A(PEA)

弗雷德里克斯堡假單胞菌熒光Cy3標記狗IgGAnti-ING1 Antibody人綠膿桿菌外A(PEA)

沃特曼籃狀菌熒光Cy3標記羊IgMAnti-ING4 Antibody人流感病A(FLU A)

半園田頭菇熒光Cy3標記豚鼠IgGAnti-ING3 Antibody人流感病A(FLU A)

彩色豆馬勃熒光Cy3標記豚鼠IgMAnti-ING4 Antibody人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)

根瘤菌熒光Cy3標記馬IgGAnti-ING5 Antibody人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)

大腸埃希氏菌熒光Cy3標記馬IgMAnti-INHBA Antibody人抗乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)

污水土地桿菌熒光Cy3標記人IgGAnti-INHBB Antibody人抗乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)

多主葡萄殼菌熒光Cy3標記人IgMAnti-INHBE Antibody人抗乙型肝炎病核心IgM抗體(HBcAb-IgM)

黑木耳熒光Cy3標記人IgAAnti-INHBC Antibody人抗乙型肝炎病核心IgM抗體(HBcAb-IgM)

Ras樣蛋白B抗體謝瓦曲霉人肺微血管內皮細胞

視網膜母細胞瘤結合蛋白5抗體鹿皮色曲霉小鼠骨樣細胞

原癌基因相關蛋白RAP2B抗體炭黑曲霉人脂肪間充質干細胞

環指蛋白6抗體泡盛曲霉煙色變種人套細胞淋巴瘤
mTOR激酶抑制劑(CC-223)鏈霉 Rubelloside B

產氣莢膜梭 B型 長壽花糖甙

外海橄欖形 槐雙氫黃酮

蜂蜜接合酵母 Rivulobirin E

假密環 槲皮-3-D-木糖甙

球色單隔孢屬 Randaiol

深酒紅短鏈游動 Rabdoketone B

瑞士乳桿 R(+)-戈米辛 M1

蘋果鏈格孢 3-O-beta-D-葡糖苷雞納酸酯

巨大芽孢桿 Quinamine

米黑根毛霉 Pyrroside B

耐冷冷桿 Putraflavone

火雞皰疹病(+)陽性血清 Pseudopalmatine

構巢裸胞殼 Przewaquinone A

解脂假絲酵母解脂變種 紫丹參萜 

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)