詳細介紹
商品介紹:
ML277(CID53347902)是一新型有效、選擇性K(v)7.1鉀離子通道激動劑,EC50為270nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1401242-74-7 別名:CID-53347902 純度:98.14% 分子量:471.59 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
ML277 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
丁羥(標準品)英文名稱: Nabumetone6號染色體開放閱讀框203抗體包裝25g
丁酞(標準品)英文名稱: Darunavir6號染色體開放閱讀框204抗體包裝5g
丁二洛沙平(標準品)英文名稱: Methoxydienone6號染色體開放閱讀框206抗體包裝25g
丁(標準品)英文名稱: DL-α-Hydroxyglutaric acid disodium salt 6號染色體開放閱讀框211抗體包裝5g
度米芬(標準品)英文名稱: Demecarium Bromide 6號染色體開放閱讀框225抗體包裝25g
對基磺(標準品)英文名稱: Desogestrel6號染色體開放閱讀框25抗體包裝5g
對基(標準品)英文名稱: Desonide 6號染色體開放閱讀框35抗體包裝1g
對基楊鈉(標準品)英文名稱: Gabexate mesylate6號染色體開放閱讀框52抗體包裝5g
對基楊(標準品)英文名稱: Gabexate mesylate6號染色體開放閱讀框57抗體包裝100g
對磺酰(標準品)英文名稱: Dexamethasone6號染色體開放閱讀框58抗體包裝25g
對酚(標準品)英文名稱: Dexamethasone6號染色體開放閱讀框62抗體包裝500g
對酚(標準品)英文名稱: Diltiazem HCL 6號染色體開放閱讀框70抗體包裝1g
對乙酰(標準品)英文名稱: Diltiazem HCL 6號染色體開放閱讀框72抗體包裝250mg
對羥基丁酯(標準品)英文名稱: Dimesna 7號染色體開放閱讀框13抗體包裝5g
對羥基乙(標準品)英文名稱: Dolasetron mesylate 7號染色體開放閱讀框29抗體包裝10MG
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規格:>98%,標準品胸腺五肽試劑盒消旋山莨菪堿;Racanisodamin
短短芽孢桿菌Brevibacillus│brevis 質量規格:>99%,BR,培養級胸腺肽β4試劑盒熊果苷;Arbutin
膠凍樣芽胞桿菌Bacillus│mucilaginosus 質量規格:HPLC>98%,標準品胸腺肽α1試劑盒熊果;Ursolic acid
K(v)7.1鉀離子通道激動劑(ML277)線粒體硫氧還蛋白2抗體樺木/樺木腦 BETULIN(RG)Human, Mouse, Rat
腫瘤壞死因子受體超家族成員5抗體樺木/樺木腦 BETULIN(SH)Human, Mouse, Rat
瞬時表達軸索糖蛋白1抗體樺木/樺木腦 BETULIN(SH)Human, Mouse
非受體酪蛋白激2抗體樺木/樺木腦 BETULIN(P)Human
腫瘤壞死因子α誘導蛋白5樺木/樺木腦 BETULIN(P)Human
腫瘤壞死因子C白果內酯 BILOBALIDE(AS)Human
轉化生長因子β4抗體白果內酯 BILOBALIDE(AS)Human
轉化生長因子β活化激結合蛋白1抗體7-去銀杏雙黃 BILOBETIN(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
硫氧還蛋白結合蛋白2抗體(+)-荷包牡丹 BICUCULLINE, (+)-(P)Human, Mouse, Rat