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詳細介紹
商品介紹：
DC_517是一種新型的,選擇性,非核苷類的DNA甲基轉移酶1(DNMT1)抑制劑(IC50=1.7μM)。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：500017-70-9 純度：98.0% 分子量：505.65 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性：
中文名稱：DNA甲基轉移酶1(DNMT1)抑制劑（DC_517）
英文名稱：DC_517
產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
枯草芽孢桿菌Pseudomonas sp.
蘇云金芽胞桿菌殺蟲亞種Pseudomonas sp.
串珠鐮孢Pseudomonas agarici
Sphingopyxis marinaPseudomonas stutzeri
梅奇酵母Pseudomonas pseudoalcaligenes
黑曲霉Burkholderia gladioli
球孢白僵菌Ralstonia eutropha
游動微菌Pseudomonas aeruginosa
卵孢木霉Pseudomonas aeruginosa
變形桿菌（普通變形桿菌）49027Pseudomonas aeruginosa
猴頭菌—常山99Pseudomonas mendocina
球孢白僵菌Pseudomonas luteola
布魯氏菌Burkholderia vietnamiensis
藍微褐鏈霉菌Ralstonia eutropha
副豬嗜血桿菌Pseudomonas mendocina
博爾扎諾鞘盒菌Achromobacter xylosoxidans
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格：含量測定
泰坦尼克號鹽單胞菌Halomonas│titanicae 質量規格：HPLC法含量測定
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質量規格：含量測定
DNA甲基轉移酶1(DNMT1)抑制劑（DC_517）Shiga-Like Toxin Type II Variant 英文名稱： 豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體 0.2ml
ET-1 英文名稱： 內皮素-1抗體 0.2ml
神經生長因子-β抗體 Anti-NGF-β 0.1ml
Anti-PILR Beta/FDFACT/FITC 熒光素標記Ⅱ型成對免疫球蛋白樣受體β蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-p70 S6 Kinase Beta 2 (Tyr389) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體 規格 0.1ml
5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg
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