詳細介紹
商品介紹:
MK8033是ATP競爭性c-Met/Ron雙重抑制劑,對野生型c-Met的IC50為1nM,對c-Met N1100Y的IC50為2.0nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1001917-37-8 純度:98.0% 分子量:471.53 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
MK-8033 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
球孢白僵菌Leisingera nanhaiensis
枯草芽孢桿菌Lactococcus raffinolactis
HydrogenophagaLactococcus lactis subsp. lactis
香菇Leuconostoc mesenteroides
紫蓋蜜環菌Lishizhenia tianjinensis
小青霉Listeria innocua
白腐盾殼霉(可訂購)Listeria monocytogenes
土曲霉Listeria monocytogenes
ATCC 33217Listeria monocytogenes
pRSF Duet-1Listonella pelagius
發酵乳桿菌Loktanella hongkongensis
杏鮑菇Loktanella hongkongensis
厄氏菌Luteimonas mephitis
條紋雞樅Luteimonas terricola
臘狀芽胞桿菌Luteimonas terricola
棱柱散尾菌中華變型Lysinibacillus boronitolerans
小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體人N端前腦鈉(NT-proBNP)格蘭地新
小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體人N端前腦鈉(NT-proBNP)脲
小鼠血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒磷化雄激受體抗體人前心鈉肽(Pro-ANP)風內酯
小鼠血小板生成(TPO)免疫試劑盒磷化雄激受體抗體人前心鈉肽(Pro-ANP)喹
c-Met/Ron雙重抑制劑(MK-8033)Sphingomyelin Synthase 2 英文名稱: 鞘磷脂合成酶2抗體 0.2ml
EXOSC10 英文名稱: 多發性肌炎/硬皮病自身抗原2抗體 0.2ml
配對盒基因2抗體 Anti-PAX2 0.1ml
Anti-SRC3/KAT13B/AIB1/FITC 熒光素標記類固醇受體輔助活化因子-3抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NFATc2(Ser330) 磷酸化核因子活化T細胞胞漿蛋白2抗體 規格 0.1ml
FasL(抗原) Multi-class antibodies規格: 0.5mg