詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Homoharringtonine | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Homoharringtonine是一種細胞毒性生物堿,作用于抗Gefitinib的肺癌細胞,誘導細胞凋亡,且通過IL-6/JAK1/STAT3信號通路來抑制STAT3。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:26833-87-4 別名:Omacetaxine mepesuccinate;HHT 純度:98.71% 分子量:545.62 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
雞松茸鼻咽癌癌基因抗體Human PALMD ELISA Kit絲蛋白(PRSS)
產紫青霉白血病抑制因子受體抗體Human PAN2 ELISA Kit絲/蘇激24(STK24)
“冰川鹽單胞菌"核纖層蛋白A抗體Human PAG1 ELISA Kit絲/蘇蛋白磷(STK)
蠟狀芽孢桿菌核纖層蛋白B抗體(核膜標志物)Human P62/SQSTM1(Sequestosome-1) ELISA Kit絲/蘇蛋白激PAK4(PAK4)
糞生花褶傘核纖層蛋白A/C抗體Human PAFAH1B3 ELISA Kit絲/蘇蛋白激B-raf(BRAF)
松杉靈芝LRIG2抗體Human PNOC(Prepronociceptin) ELISA Kit水蛭(HRD)
淡紫擬青霉淋巴增強因子-1抗體Human P5CS ELISA Kit水閘蛋白14(CLDN14)
病研所芽孢桿菌LRIG1抗體Human PAFAH2(Plaet-activating factor acetylhydrolase 2) ELISA Kit水通道蛋白5(AQP-5)
冷湖黃桿菌LRIG3抗體Human P62/SQSTM1(Sequestosome-1) ELISA Kit水通道蛋白4抗體(AQP-4 Ab)
球孢白僵菌肝腸鈣粘連蛋白抗體Human PAG1 ELISA Kit水通道蛋白4(AQP-4)
釀酒酵母透明質受體抗體Human PABPC4 ELISA Kit水通道蛋白4(AQP4)
總狀共頭霉17號染色體開放閱讀框82抗體Human PACSIN1 ELISA Kit水通道蛋白3(AQP-3)
扭托甲基桿菌轉錄因子LMCD1抗體Human PACS2 ELISA Kit水通道蛋白2(AQP-2)
大球蓋菇淋巴抗原76抗體Human PACSIN2 ELISA Kit水通道蛋白2(AQP2)
土曲霉富含亮重復序列LRP15抗體Human PACSIN3 ELISA Kit水通道蛋白1(AQP-1)
齒孢青霉富含亮重復跨膜神經元蛋白1抗體Human OXCT2 ELISA Kit水通道蛋白1(AQP1)
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質量規格:>90.0%(HPLC)朝藿定B
阿姆斯特丹散囊菌Eurotium│amstelodami 質量規格:>95.0%(HPLC)朝藿定A
海洋桿菌Pontibacter│sp. 質量規格:>98.0%(T)獐牙菜苦苷
STAT3抑制劑ATCC 34877 鄰溴苯IκB激-βElisa
毛霉屬 2-巰基苯并咪唑高鐵肌紅蛋白還原Elisa
卷枝毛霉卷枝變型 雙酮-D-葡萄糖相關糖蛋白1Elisa
原玻璃蠅谷氨酸桿 三苯血吸蟲Elisa
短波單胞屬 乙合氨三聚體萊姆病IgG抗體Elisa
沼澤粘液桿 2,6-二甲基萘2,3-二磷酸甘油酸Elisa
尖孢鐮孢 6-氨基喹啉Ⅰ型膠原C端肽Elisa
根際考克氏 2-溴萘Ⅰ型膠原N末端肽Elisa
高山腐霉 鄰-(2,3,4,5,6-五氟芐基)羥鹽酸鹽Ⅱ型膠原C端肽Elisa
芽胞桿 7,12-二并[a]蒽Ⅳ型膠原蛋白Elisa
鏈孢囊 2,6-二乙基苯(DEA)CD30分子Elisa
大豆慢生根瘤 2-氨基-5-溴CXC趨化因子配體16Elisa
滑菇 4--2-氟苯C-反應蛋白Elisa
黑曲霉 8-氨基喹啉C肽Elisa
豌豆根瘤 鄰溴苯甲D二聚體Elisa