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詳細介紹
商品介紹：
KH-CB19是CDC2-like Kinase CLK1/4高效選擇性抑制劑，對CLK1的IC50值20nM，對CLK2/3作用弱。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1354037-26-5 純度：99.45% 分子量：338.19 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
KH-CB19 | 1mL(10mM)|1mg|5mg | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
灰褐鏈霉菌Pseudomonas fragi
氏黃褐桿菌Pseudomonas mendocina
枯草芽孢桿菌枯草亞種Pseudomonas luteola
鏈霉菌Pseudomonas aurantiaca
亮白曲霉Ralstonia eutropha
芬萊氏鏈霉菌Delftia acidovorans
寡雄腐霉Pseudomonas tolaasii
化物檢測試劑包 Pseudomonas luteola
短桿菌屬Pseudomonas chlororaphis
布魯氏菌 生物Ⅱ型Burkholderia multivorans
河道紅冬孢鎖擲孢酵母Pseudomonas fluorescens
乳粉 霉菌和酵母計數 Pseudomonas fluorescens
小孔異擔子菌*Ralstonia eutropha
嗜熱類芽孢桿菌Pseudomonas viridiflava
鮑姆木層孔菌Pseudomonas putida
壺黑蛋巢布諾德變型Pseudomonas fluorescens
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質量規格：鑒別
硬柄小囊菌Microascus│stysanophorus 質量規格：含量測定
NBRC13957=ATCC14485資源名稱: 嗜熱鏈球菌 質量規格：含量測定
CDC2-like Kinase CLK1/4抑制劑（KH-CB19）SUZ12 英文名稱： 胚胎干細胞抑制蛋白Suz12抗體 0.2ml
Estrogen Related Receptor gamma 英文名稱： 雌激素受體相關蛋白3抗體 0.2ml
胸腺素β10抗體 Anti-Tβ10 0.1ml
Anti-Trop-2/gp50/Tpm2 /FITC 熒光素標記原肌球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-INPPL1(Ser576) 肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體 規格 0.1ml
TGF-Alpha (Ttansforming Growth Factor –Alpha) 轉移生長因子–α(抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg
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