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詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
產品屬性：
中文名稱：DYRK抑制劑(ID-8)
英文名稱：ID-8
產品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期：1～3天
商品介紹：
ID-8是DYRK抑制劑，長時間培養(yǎng)可維持胚胎干細胞的自我更新。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ CAS號：147591-46-6 純度：98.0% 分子量：298.29 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
紅色蠟蘑Pseudomonas fluorescens大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)
黑根霉Pseudomonas fluorescens大鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)
米根霉Pseudomonas fluorescens大鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)
釀酒酵母Pseudomonas fluorescens大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)
阿舒多囊霉Pseudomonas fluorescens大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)
蓋氏假單胞菌Pseudomonas fluorescens大鼠內皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)
伯克霍爾德氏菌屬Pseudomonas fluorescens大鼠內皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)
膠孢Pseudomonas fluorescens大鼠膽固酯轉移蛋白(CETP)
生活飲用水 大腸埃希氏菌Pseudomonas fluorescens大鼠膽固酯轉移蛋白(CETP)
青霉 Pseudomonas fluorescens大鼠血管緊張原(aGT)
類銀白紫絲膜菌Pseudomonas fluorescens大鼠血管緊張原(aGT)
Pseudomonas fluorescens大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)
黑木耳Pseudomonas fluorescens大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)
損蘑菇紫色桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠二(MDA)
枯草芽胞桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠二(MDA)
洛斯里被毛孢Pseudomonas fluorescens大鼠超氧化物歧化(SOD)
蛋白酪磷-1B抗體芒果囊孢菌屬過氧化氫(CAT)比色法測試盒
野生型P53誘導基因1單克抗體紅褐肉座菌過氧化物(GSH-Px)比色法測試盒
蛋白質精甲基轉移1抗體松色二胞菌過氧化物(POD)比色法測試盒(測植物)
磷化蛋白激樣內質網激抗體柳屬半明小黑腐皮殼菌抗壞血過氧化物(APX)比色法測試盒
DYRK抑制劑(ID-8)熱帶假絲酵母 羧甲基葡聚糖凝膠C-25
香菇 葡聚糖凝膠LH-60
球毛殼 纖細
嗜熱脂肪地芽胞桿 葡聚糖凝膠LH-20
球形芽孢桿 表小檗堿
波茨坦短芽孢桿 葡聚糖凝膠G-200
爪哇漏斗狀側耳（鳳尾菇） 地榆皂苷II
耐寒短桿 葡聚糖凝膠G-150
斐濟球腔 地榆皂苷I
釀酒酵母 葡聚糖凝膠G-100
根瘤 葡聚糖凝膠G-75
無二酸檸檬酸桿 葡聚糖凝膠G-50
干酪 葡聚糖凝膠G-25
德氏乳桿保加亞亞種 葡聚糖凝膠G-15
費希爾曲霉 葡聚糖凝膠G-10
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