兔血管外膜成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔血管外膜成纖維細胞分離自血管外膜組織；血管外膜是由疏松結締組織組成，其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結締組織細胞以成纖維細胞為主，當血管受損傷時，成纖維細胞具有修復外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處，有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一，其主要生理功能合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔血管外膜成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的兔血管外膜成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

RTN4R Others Mouse 小鼠 RTN4R / NOGOR 人細胞裂解液   TNFRSF8 Others Human 人 TNFRSF8 / CD30 人細胞裂解液   PDPN Others Human 人 PDPN / Podoplanin 人細胞裂解液 兔原代肝內膽管上皮細胞 人原代成骨細胞

Lin-28同源物A(LIN28A)重組蛋白 Recombinant Lin-28 Homolog A (LIN28A)

C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標簽)

IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

GPT Protein Rat 重組大鼠 GPT1 / GPT 蛋白 (His 標簽)

RCN3重組人 RCN3 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒 ，英文名： NF-κB p65 ELISA Kit

Rabbit heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 兔熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒

嗜肺軍團桿菌(LP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseBeta-catenin,Beta-catELISAKit小鼠β連環蛋白/聯蛋白

體液肌酸激酶(CK)總活性酶連續循環比色法定量試劑盒20次

2D3/DVD/DHVD3OH人1,25二羥基D3

總合成酶（NOS）測試盒[測總NOS（T－NOS）]

（NO）測定試劑盒（微板法）

（NO）測定試劑盒（還原酶法）

ATP酶測試盒（測普通組織勻漿的Na+K+、Ca2+Mg2+－ATP酶，樣本前處理不需高速離心）

兔血管外膜成纖維原代細胞豬肉毒堿脂酰轉移酶(CACT)試劑盒

Human kallikrein 8 (KLK 8) ELISA Kit 人8(KLK 8)試劑盒

guineapigIerleukin6,IL-6ELISAKit 豚鼠白介素6(IL-6)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforANGIIR-1(HumanangiotensionIIreceptor1)ELISAKit人血管緊張素Ⅱ受體1

血液脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量試劑盒20次

Porcinediamineoxidase,DAOELISAKit豬氧化酶(DAO)試劑盒

IL2RG重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白  Protein

GLUT1(Glucose transporter type 1 0.5mgGLUT1(Glucose transporter type 1) 葡萄糖轉運蛋白1(抗原)

FCGR3B重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白 Protein

APOL1 Protein Human 重組人 APOL1 / apolipoprotein L1 蛋白 (His 標簽)

KIRREL3 Protein Mouse 重組小鼠 KIRREL3 / NEPH2 蛋白 (His 標簽)