小鼠肝枯否原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形、巨噬細胞

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠枯否細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。枯否氏細胞(Kupffer細胞)是肝臟的肝血竇內一些固定于竇壁的巨噬細胞，它能吞噬和清除大部分從腸道來的抗原微粒，并能吞噬和清除肝血竇中的細菌、異物和衰老的紅細胞，并把血紅蛋白分解成。此外，肝巨噬細胞也有處理抗原，誘導T細胞增殖，參與免疫調節的作用?？莘袷霞毎鸵话憔奘杉毎煌?，枯否氏細胞不具有增加抗原免疫原性的能力，相反有消除或減弱抗原性的作用?？莘袷霞毎芡淌蓙碜匝貉h的抗原抗體復合物和其他有害物質，以消除這些物質對機體的損害?？莘窦毎δ苷系K可導致腸源性內毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠肝枯否細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠肝枯否細胞經CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

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　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

SK-N-MC(人神經上皮瘤細胞)   人癌細胞;MDA-MB-468  敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1  NIH/3T3細胞，鼠成纖維細胞系 人Butts淋巴瘤細胞系,CA46細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1  NRXN3 Others Human 兔原代腸巨噬細胞 人原代宮頸上皮細胞

ABCG1 peptide 三0酸腺苷結合盒亞家族G1抗原 0.5mgABCG1 peptide 三0酸腺苷結合盒亞家族G1抗原

CALML5 Protein Human 重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標簽)

IGFBP6重組小鼠 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標簽) Protein

TNFRSF17 Protein Rat 重組大鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白

MMP19重組人 RASI-1 / MMP19 蛋白 Protein

大鼠胱硫醚γ裂解酶(CSE)試劑盒 ，英文名： CSE ELISA Kit

Rabbit collagen type II (Col II) ELISA Kit 兔子Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)試劑盒

鼻病毒(RV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-2/GelatinaseA(HumanMaixmetalloproteinase2/GelatinaseA)ELISAkit人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A

體液基質金屬蛋白酶(MMP-2)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitT3犬三甲狀腺原

胰島素樣生長因子結合蛋白5   英文名稱：   human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5   規格：      英文縮寫：   IGFBP5

胰島素   英文名稱：   Human Insulin   規格：      英文縮寫：   INS

細胞間粘附分子1   英文名稱：   Human Iercellular Adhesion Molecule 1   規格：      英文縮寫：   ICAM-1

干擾素α受體   英文名稱：   Human Ierferon α Receptor   規格：      英文縮寫：   IFNαR

小鼠肝枯否原代細胞小鼠鼠總抗氧化能力( T-AOC)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human measles virus IgG (MV IgG) ELISA Kit 人麻疹病毒IgG(MV IgG)試劑盒

HumanConnexin,CxELISAKit 人間隙連接蛋白(Cx)試劑盒 96T/48T 進口分裝

DuckIerleukin-8,IL-8試劑盒鴨白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒規格：96T/48T

藻類高效液相色譜法定量試劑盒20次

MouseCystatinC,Cys-CELISAKit小鼠半胱蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)試劑盒規格：96T/48T

HRG重組人 HPRG / HRG 蛋白 Protein

血管生長素(ANG)重組蛋白 Recombinant Angiogenin (ANG)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Brevig Mission/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL7R Protein Human 重組人 IL7RA / CD127 蛋白

GAG-P24 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group O, strain BCF06)