人源NK原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 短梭形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 

人NK細胞分離自人外周血單個核細胞；NK細胞即自然殺傷細胞（natural killer cell，NK）是機體重要的免疫細胞，不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調節有關，而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發生，能夠識別靶細胞、殺傷介質。NK細胞來源于骨髓淋巴樣干細胞，其分化、發育依賴于骨髓及胸腺微環境，主要分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴結。NK細胞不同于T、B細胞，是一類無需預先致敏就能非特異性殺傷腫瘤細胞和病毒感染細胞的淋巴細胞。由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制，不依賴抗體，因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富，含有較大的嗜天青顆粒，顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早，在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞（包括部分細胞系）、病毒感染細胞、某些自身組織細胞（如血細胞）、寄生蟲等，因此NK細胞是機體抗腫瘤、抗感染的重要免疫因素，也參與第Ⅱ型超敏反應和移植物抗宿主反應。

方法簡介：

公司實驗室分離的人外周血NK細胞采用取外周血、通過密度梯度離心、差速貼壁、細胞因子誘導法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人源NK細胞經CD56免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　?、芷鞴倥囵B

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

Promocell C-25020 Hepatocyte Maienance Medium, 肝細胞維持培養液 500ml  MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin (aa 296-580) 人細胞裂解液   CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 兔原代脊髓神經元細胞 兔原代甲狀腺上皮細胞

Caspase-6 (CT 0.5mgCaspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)

FABP3 Protein Human 重組人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白

TIMD4重組小鼠 TIM4 / TIMD4 蛋白 Protein

CSF1R Protein Rat 重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白

FAM3B重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標簽) Protein

大鼠基質金屬蛋白酶16(MMP16)試劑盒 ，英文名： MMP16 ELISA Kit

Mouse histone H2b (histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒

Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 大鼠原激活肽(TAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforF1+2(Humanprothrombinfragme1+2)ELISAkit人原片段F1+2

細胞結構型內皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量試劑盒20次

Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規格：96T/48T

兔子上腺髓質素(ADM)試劑盒   96T/48T

兔子神經營養因子4(-4)試劑盒   96T/48T

兔子神經營養因子3(-3)試劑盒   96T/48T

兔子神經特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒   96T/48T

人源NK原代細胞小鼠神經降壓肽()試劑盒 96T/48T

Human membrane attack complex (MAC) ELISA Kit 人膜攻擊復合物(MAC)試劑盒

HumanHighdensitylipoproteincholesterol,HDL-CELISAKit 人高密度脂蛋白(HDL-C)試劑盒 96T/48T 進口分裝

GoatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRP試劑盒山羊生長激素釋放多肽(GHRP)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母堿性焦0酸酶(AlkalinePyrophosphatase)活性比色法定量試劑盒20次

MousecoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit小鼠Ⅹ(FⅩ)試劑盒規格：96T/48T

FCGR1重組大鼠 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His 標簽) Protein

HIV-1(human immunodeficiency virus type 1 0.5mgHIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)

SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 (His 標簽) Protein

ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (His 標簽)

IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白