人真皮成纖維原代細胞

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人真皮成纖維細胞分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持組織的正常形態，合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

方法簡介：

公司實驗室分離的人真皮成纖維細胞采用先蛋白酶消化、后蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人真皮成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

Promocell C-25110 Hepatocyte Growth MediumKIT, 肝細胞生長套裝 500ml  PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細胞裂解液   CTSV Others Human 人 Cathepsin V / Cathepsin L2 兔原代脊髓成纖維細胞 大鼠原代甲狀旁腺細胞

白介素8受體α(IL8Rα)重組蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)

FABP2 Protein Human 重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白

VTCN1重組小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 標簽) Protein

PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白

IL1R2重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein

大鼠基質金屬蛋白酶13(MMP13)試劑盒 ，英文名： MMP13 ELISA Kit

Mouse cathepsin K (cath-K) ELISA Kit 小鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒

RatvisfatinELISAKit 大鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforF1+2(Rabbitprothrombinfragme1+2)ELISAKit兔原片段F1+2

細胞結構型內皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量試劑盒20次

Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISAKit大鼠受體(M-AChR)試劑盒規格：96T/48T

小鼠α半乳糖基抗原試劑盒   小鼠α半乳糖基抗原試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠α半乳糖基抗原試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠α半乳糖基抗原試劑盒、小鼠α半乳糖基抗原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒   小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒、小鼠αN已酰基葡糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒   小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒、小鼠αL巖藻糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒   小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

人真皮成纖維原代細胞小鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human membrane cofactor protein (MCP/CD46) ELISA Kit 人膜輔蛋白(MCP/CD46)試劑盒

Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein,LRP-6ELISAKit 人低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP-6)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Goatgrowthhormonereleasinghormone,GHRH試劑盒山羊促生長激素釋放激素(GHRH)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量試劑盒20次

MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒規格：96T/48T

HA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein

Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mgPodoplanin Protein 平足蛋白抗原

JAG1重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白  Protein

B3GALT5 Protein Human 重組人 B3GALT5 蛋白

SELE Protein Human 重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標簽)