詳細介紹
商品介紹:
BIX02189是MEK5/ERK5選擇性抑制劑,IC50為59nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1265916-41-3 純度:99.65% 分子量:440.54 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
BIX02189 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
阿穆爾斯克灣鹽地桿菌人α淀粉Bacillus cereus小鼠血管生成4(ANG-4)
黑腐皮殼菌人堿性磷Bacillus cereus小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)
核黃氧化德沃斯氏菌人天青殺Bacillus cereus小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)
蕈狀芽孢桿菌人血管緊張肽ABacillus cereus小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)
膠紅酵母人胰淀粉Bacillus cereus小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)
牛輪狀病(可訂購)人α烯化Bacillus cereus小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)
蠟狀芽孢桿菌人膠原IIBacillus cereus小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)
冷海水黃桿菌人膠原IBacillus cereus小鼠CD30分子(CD30)
短芽孢桿菌人磷化蛋白激CBacillus cereus小鼠CD30分子(CD30)
毛殼人磷化外信號調節激Bacillus cereus小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ
黑曲霉人乙酰酯Bacillus cereus小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ
Brevibacillus parabrevis人葡萄糖氧化Bacillus cereus小鼠可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)
克魯斯假絲酵母人酪羥化Bacillus cereus小鼠可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)
紅托竹蓀人多巴脫羧Bacillus cereus小鼠嗜粒趨化因子(ECF)
硬結節桿菌人神經元性烯化Bacillus cereus小鼠嗜粒趨化因子(ECF)
伯克霍爾德氏菌人多巴-β羥化Bacillus cereus小鼠嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)
WD重復蛋白16抗體蠶蛹1號小鼠肝細胞AML12(干細胞庫保藏)
WW結構域E3泛連接1抗體平菇2000(京瑞)大耳山羊肺細胞
乙型肝炎X相關蛋白2抗體PL20(雙抗黑平)正常小鼠睪丸Sertoli細胞
X射線修復交叉互補蛋白4抗體嗜熱側孢霉昆蟲細胞
MEK5/ERK5抑制劑(BIX02189)膠紅酵母 甘草酸二
運動節桿 偶氮膦Ⅰ
擬莖點霉 甘草苷元-7-O-D-芹糖-4'-O-D-葡萄糖苷
Brevibacillus 堿藍6B
沃氏葡萄球 根薯酮內酯B
杏鮑菇 酸性茜藍B
Lysobacter soli 根薯酮內酯A
焦曲霉 茜黃R鈉鹽
嗜根考克氏 茜黃R
芽孢桿屬 骨化二
枯草芽孢桿 茜黃GG
巨型艾耳球蟲 鬼臼-4-O-葡萄糖苷
粟粒皮禿馬勃 茜紫3B
肉色鏈孢囊 戈米辛G
紫色紅曲霉 光翠雀堿