微管蛋白抑制劑(Mc-MMAE)公司正在出售的產品：Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) /FITC 熒光素標記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
NAIF1 protein( CB12-327) 核凋亡誘導因子蛋白1(多肽)Multi-class antibodies規格： 0.5mg
卵巢癌抗

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。

建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
香栓孔菌Burkholderia gladioli兔子內皮抑(ES)

擬蠶豆葡萄孢Achromobacter xylosoxidans兔子內皮1(ET-1)

CarnobacteriumBurkholderia cepacia兔子內皮1(ET-1)

突孢毛殼Burkholderia cepacia兔子免疫球蛋白G(IgG)

假單胞菌屬Achromobacter xylosoxidans兔子免疫球蛋白G(IgG)

沙福芽孢桿菌Burkholderia cepacia兔子免疫球蛋白E(IgE)

釀酒酵母Delftia acidovorans兔子免疫球蛋白E(IgE)

焦曲霉Ralstonia pickettii兔子免疫球蛋白A(IgA)

竹喙球菌Burkholderia cepacia兔子免疫球蛋白A(IgA)

盤長孢狀盤孢Burkholderia gladioli兔子可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)

蘋果鏈格孢Burkholderia gladioli兔子可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)

解淀粉芽胞桿菌Enterococcus faecium兔子可溶性間粘附分子1(sICAM-1)

釀酒酵母Micrococcus luteus兔子可溶性間粘附分子1(sICAM-1)

泡盛曲霉Burkholderia cepacia兔子可溶性E選擇(sE-selectin)

動物雙歧桿菌動物亞種Paenibacillus polymyxa兔子可溶性E選擇(sE-selectin)

云微所奇異球菌Enterobacter aerogenes兔子巨噬炎性蛋白5(MIP-5)

V5tag標簽抗體氣單胞菌達累斯薩姆沙門氏菌

血管抑制蛋白1抗體伸長鹽單胞菌（長鹽單胞菌）伊斯特本沙門氏菌

囊泡乙酰通道抗體鞘盒菌（無法提供）浦那沙門氏菌

空泡分選蛋白18抗體玫瑰色微球菌翁德斯太浦沙門氏菌
微管蛋白抑制劑(Mc-MMAE)樟子松枯梢病 乙脫氫

紅外電熱滅器 乙脫氫

羊肚（不能訂購） 抗壞血酸氧化

大腸埃希 木聚糖

局限青霉 溶壁

 

Roseomonas 輔Q10

枯草芽孢桿 輔羧

糙皮側耳 還原輔Ⅱ四鈉鹽

毛榛畢赤酵母 氧化型輔Ⅱ二鈉

釀酒酵母 氧化型輔Ⅱ自由酸

擴展青霉 還原輔Ⅰ抑制劑

平菇 還原輔Ⅰ二鈉鹽

米曲霉 氧化型輔Ⅰ

短芽孢桿 硫代氧化型輔I