詳細介紹
商品介紹:
BDP5290是ROCK和MRCK的有效抑制劑,對于ROCK1,ROCK2,MRCK1和MRCK2的IC50值分別為5nM,50nM,10nM和100nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1817698-21-7 分子量:371.82 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
BDP5290 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
小鼠中期因子(MK)ELISA試劑盒 ,英文名: MK ELISA Kit
犬腎上腺髓質素(ADM)ELISA檢測試劑盒Canineadrenomedullin,ADMELISAKit 96T/48T
犬熱休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)免疫試劑盒 Dog heat shock 70 kDa protein 1A,HSPA1A ELISA kit
英文名稱humanf-E3ELISAKIT人游離雌三醇(f-E3)規格:96T/48T
初級離心柱DNA回收試劑盒20次
Rathemeoxygenase2,HO-2ELISA試劑盒大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠白介素13受體α2(IL13Rα2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL13Rα2 ELISA Kit
人白三烯C4(LTC4)ELISA檢測試劑盒HumanLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit 96T/48T
大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)免疫試劑盒 Rat A Disiegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit
英文名稱Ratα-L-fucosidaseausefulELISAKit大鼠α-L-巖藻糖苷酶(AFU)規格:96T/48T
咖啡甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitNA人去甲腎上腺素規格:48T/96T
豬口蹄疫病毒(FMDV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human basic fetoprotein (BFP) ELISA Kit 人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA試劑盒
PorcineFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 豬血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAMA(Humanai-Monocyteaibody)ELISAKit人抗單核細胞抗體規格:48T/96T
血液過氧化氫酶(CATALASE)過氧化活性比色法定量檢測試劑盒20次
PlaVitaminK1,VK1ELISAKit植物維K1(VK1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
ROCK和MRCK抑制劑(BDP5290)Socs 2 英文名稱: 細胞因子信號傳導抑制蛋白2抗體 0.1ml
FOG1 英文名稱: GATA結合蛋白1伴侶蛋白抗體 0.2ml
中腦核仁蛋白2抗體 Anti-Midnolin isoform Protein 2 0.2ml
Anti-S-100A1/FITC 熒光素標記鈣結合蛋白S100A1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PEA15 (Ser104) 磷酸化星形膠質細胞PEA15抗體 規格 0.1ml
TRH (Thyrotropin releasing hormone ) 促甲狀腺素釋放激素Multi-class antibodies規格: 10mg