RAF/MEK雙重抑制劑(Ro 5126766)公司*的產(chǎn)品：VTG ELISA Kit 鯉魚卵黃蛋白原硝 99.99% metals basis
GnRH ELISA Kit 魚類促性腺激釋放激硝 99.997% metals basis
Fish Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit 魚類狀腺原氨高 CP,70.0-72.0%
Fish Cortisol

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：RAF/MEK雙重抑制劑(Ro 5126766)

英文名稱：Ro 5126766

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

黃銹傘Cy3標(biāo)記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADCK2 Antibody脫氫β(PDHβ)

赭色擲孢酵母Cy5標(biāo)記的鼠抗人IgG單克抗體Anti-ADCK5 Antibody脫氫α(PDHα)

竹針孢座囊菌Anti-ADCY3 Antibody羧化(PC)

釀酒酵母Anti-ADCY4 Antibody糖磷異構(gòu)1(TPI1)

耐冷冷桿菌Anti-ADCY5 Antibody肽(AAP)

棲稻黃色單胞菌Anti-ADCY6 Antibody/絲/半胱/蘇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ASCT1)

釀酒酵母Anti-ADCY9 Antibody別孕烯(AP)

無(wú)環(huán)田頭菇Anti-ADD2 Antibody表皮轉(zhuǎn)谷酰(TGM3)

煙色擬盤多毛孢Anti-ADD3 Antibody表皮調(diào)節(jié)(EREG)

球孢白僵菌Anti-ADGRA1 Antibody表皮生長(zhǎng)因子途徑底物蛋白3(EPN3)

八孢裂殖酵母Anti-ADD1 Antibody表皮生長(zhǎng)因子途徑底物蛋白2(EPN2)

弗雷德里克斯堡假單胞菌牛血清白蛋白（第五組分）Anti-ADCY8 Antibody表皮生長(zhǎng)因子途徑底物蛋白1(EPN1)

華根霉FITC標(biāo)記蛋白-GAnti-ADGRA2 Antibody表皮生長(zhǎng)因子受體2(EGFR2)

多黏類芽孢桿菌膽固Anti-ADGRB2 Antibody表皮膜蛋白3(EMP3)

弗蘭克氏菌β淀粉樣肽1-16（多肽蛋白）Anti-ADGRB1 Antibody表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)

Corynebacterium variabileβ淀粉樣肽31-35（多肽蛋白）Anti-ADGRD2 Antibody表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白D(SPD)

過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體粟褐芽孢桿菌大鼠胰腺組織提取物

p53調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)蛋白1抗體沙門氏菌IV大鼠乳腺組織提取物

泛甲基賴抗體熏衣草灰鏈霉菌大鼠淋巴組織提取物

磷脂爬行3抗體淺灰鏈霉菌杭州變種大鼠卵巢組織提取物
RAF/MEK雙重抑制劑(Ro 5126766)皺折曲霉 Obtucarbamate B

谷氨酸棒桿 Neochamaejasmin B

黑木耳 Neochamaejasmin B

產(chǎn)氨棒桿 5,7,4'-Trihydroxy-3,6-dimethoxy

釀酒酵母 4-Hydroxy-11,12,13-trinor-5-eude

淺白隱球酵母 3α-Angeloyloxypterokaurene L3

微孢毛霉 3-Epiakebonoic acid

米根霉 28-Deoxonimbolide

弗雷德里克斯堡假單胞 15-Dihydroepioxylubimin

微白黃鏈霉 10-O-Methylprotosappanin B

乳酒假絲酵母 1,7-二(4-羥基苯基)-6-庚烯-3-酮

深紅紅螺* （Z）-阿枯米定堿

平臍蠕孢 Vandrikidine

Rufibacter Sulfocostunolide A

沖擊地土地桿 繡線菊堿A 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)