兔骨骼肌原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段，叫做一個肌節。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞，細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方，細胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔骨骼肌細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的兔骨骼肌細胞經α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

CROT Others Human 人 CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   NCI-H1650(人非小細胞肺癌細胞)     CL-0097HCT-15(人結腸癌細胞)  雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12 小鼠原代三叉神經元細胞 兔原代三叉神經星形膠質細胞

CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)

H1F0 Protein Human 重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白

CD63重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標簽) Protein

PCSK9 Protein Mouse 重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白

FCER2重組人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein

大鼠組胺H3受體(HRH3)試劑盒 ，英文名： HRH3 ELISA Kit

Mouse ai sperm aibody (AsAb) ELISA Kit 小鼠抗抗體(AsAb)試劑盒

Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit 小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanlymphocytefactorELISAKit人淋巴細胞因子

土壤(lithium)化學比色法定量試劑盒50次

ELISAKitdsDNA大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體

小鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒   96T/48T

小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)試劑盒   96T/48T

小鼠免疫球蛋白M(IgM)試劑盒   96T/48T

小鼠免疫球蛋白G(IgG)試劑盒   96T/48T

兔骨骼肌原代細胞豚鼠內皮素1(EDN1)試劑盒 ，英文名： EDN1 ELISA Kit

Human parathyroid hormone related peptide (PTHrp) ELISA Kit 人副甲狀旁腺激素相關肽(PTHrp)試劑盒

rabbitImmunoglobulinA,IgAELISAKit 兔子免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBALP(Humanbonealkalinephosphatase)ELISAKit人骨堿性0酸酶

線蟲β-半乳糖苷酶化學發光定量試劑盒20次

RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit兔子Ⅱ(FⅡ)試劑盒規格：96T/48T

MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 Protein

乙酰羧化酶α(ACACα)重組蛋白 Recombinant Acetyl Coenzyme A Carboxylase Alpha (ACACa)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

HAVCR1 Protein Human 重組人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白 (His & Fc 標簽)

GST Protein Schistosoma japonicum 重組日本血吸蟲 Glutathione S-transferase / GST 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。