兔肌源性干原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔肌源性干細胞分離自肌肉組織；肌源性干細胞（MDSCs）屬于成體多能干細胞，具有多細胞系分化和自我更新能力。通過誘導刺激，MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經細胞等多種細胞和組織類型；作為基因治療和組織工程的供體細胞，已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養不良等疾病的研究熱點；近年來，肌源性干細胞在治療尿失禁等方面的應用逐步得到重視。需注意的是，肌源性干細胞主要存在于骨骼肌組織中，只是成熟組織的很少部分細胞；平時處于靜止狀態，在細胞應激和組織缺失時才會激活；并且隨著年齡的增加，所含細胞數量逐漸減少，而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進行。肌源性干細胞的體外擴增對細胞移植和干細胞介導的基因治療至關重要。對肌源性干細胞的擴增研究發現，EGF、FGF-2和SCF可以通過減數分裂或促使不分裂細胞進入有絲分裂周期，從而刺激細胞增生。更重要的是，細胞因子誘導的體外擴增可以通過自我更新不刺激細胞分化，從而保持干細胞表型。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔肌源性干細胞采用膠原酶-蛋白酶-蛋白酶聯合消化法結合密度梯度離心、差速貼壁法，后通過肌源性干細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的兔肌源性干細胞經Sca-1免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

CRP Others Rat 大鼠 CRP / C-reactive 人細胞裂解液   HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   CM-R078 小鼠原代三叉神經星形膠質細胞 小鼠原代肺微血管內皮細胞

CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉化生長因子β受體抗原 0.5mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉化生長因子β受體抗原

HAGH Protein Human 重組人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白

SERPIND1重組小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 Protein

IL7 Protein Rat 重組大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白

SRC重組人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

大鼠阻抑素(PHB)試劑盒 ，英文名： PHB ELISA Kit

Mouse tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)試劑盒

MouseNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 小鼠神經生長導向因子Slit2試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanlungcancerMarkerELISAKit人肺癌標志物

土壤砷元素比色法定量試劑盒20次

ELISAKitA大鼠抗受體

兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔肌源性干原代細胞小鼠TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 大鼠酶2(CA-2)試劑盒

HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit 人新生甲狀腺素(NN-T4)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanclusterin,CLU試劑盒人凝聚素(CLU)試劑盒規格：96T/48T

組蛋白脫乙酰化酶3(HDAC3)活性比色法定量試劑盒20次

Humaeversei-iodothyronine,3ELISAKit人反三甲狀腺原(3)試劑盒規格：96T/48T

SERPINA1A重組小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 蛋白 Protein

堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2)

CETN2重組人 CETN2 / Centrin 2 蛋白 Protein

HIF1A Protein Human 重組人 HIF-1 alpha / HIF1A 蛋白

CD4 Protein Ferret 重組雪貂 CD4 / Leu-3 蛋白