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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
GSK2334470 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
GSK2334470是高效特異性的的PDK1抑制劑，IC50值為10nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1227911-45-6 純度：99.87% 分子量：462.59 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
金黃色葡萄球菌瘦受體抗體Human PIK3C2B ELISA Kit角蛋白20(CK-20)
枯草芽孢桿菌項韌帶彈性蛋白抗體Human PIK3IP1 ELISA Kit角蛋白20(CK20)
粘鞭霉氧化低密度脂蛋白抗體Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) ELISA Kit角蛋白19(CK-19)
香菇轉化生長因子β結合蛋白4抗體Human PIK3C2B ELISA Kit角蛋白18-M65(CK 18-M65)
香菇G蛋白偶聯受體69BHuman PIK3IP1 ELISA Kit角蛋白18-M30(CK 18-M30)
草青霉李斯特菌菌體蛋白抗體Human PIK3C2G ELISA Kit角蛋白18(CK-18)
假單胞菌屬Rho的鳥嘌呤核苷交換因子12抗體Human PILRA ELISA Kit角蛋白17(CK17)
果生鏈核盤菌白血病相關蛋白5抗體Human PIGB ELISA Kit角蛋白13(CK-13)
三棱孢小囊菌富含亮重復蛋白62抗體Human PIM2(Serine/threonine-protein kinase pim-2) ELISA Kit間粘附分子3(ICAM-3/CD50)
米氏假單胞菌淋巴磷蛋白磷相關蛋白抗體Human PI3K p55(gamma) ELISA Kit間粘附分子2(ICAM-2/CD102)
解淀粉周培瑾氏菌含亮神經膠質瘤失活蛋白4抗體Human KLB(Beta-klotho) ELISA Kit間粘附分子1(ICAM-1/CD54)
皺曲毛殼淋巴性白血病相關序列1抗體Human PIF1 ELISA Kit間粘附分子1(ICAM-1)
鼠乳桿菌L-瓜抗體Human PICK1 ELISA Kit性T淋巴相關抗原4(CTLA-4/CD152)
釀酒酵母半胱蛋白抗體Human PIGK ELISA Kit相關蛋白A(CagA)
釀酒酵母乳脫氫D抗體Human PIG3 ELISA Kit(CTX)
福氏志賀氏菌蛋白激LYK5抗體Human PIGA ELISA Kit凋亡抑制因子(IAP)
傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質量規格：>97.0%(HPLC)(N)松脂二葡萄糖苷
彎孢單頂孢Monacrosporium│gampsosporum 質量規格：>98.0%(HPLC)(N)吳茱萸次堿
小單孢菌Micropolyspora│sp. 質量規格：>90.0%(HPLC)吳茱萸堿
PDK1抑制劑(GSK2334470)畢赤酵母 對苯色氧化Elisa
硬柄小皮傘 4-甲氧基苯乙烯甲硫氨酸腦啡肽Elisa
*蜜環 對甲苯肼鹽酸鹽5羥色Elisa
孟氏假單胞 1-溴-3-苯基烷曼氏桿抗體Elisa
蠟樣芽孢桿 賓雪德拉氏綠隱色堿巴氏桿A型抗體Elisa
禾谷鐮孢 二苯基環己基膦葡萄糖Elisa
金耳 Z-L-苯氨病性腹瀉病抗體Elisa
變異短波單胞 3-肼鹽酸鹽巴貝斯蟲病抗體Elisa
橄欖色盤多毛孢 環己烯甲酸雙芽巴貝斯蟲病抗體Elisa
糞鏈球 間苯二甲酸-5-磺酸鈉（5-SSIPA）Ⅲ型膠原蛋白Elisa
羊肚 5-Ⅱ型膠原蛋白Elisa
黑曲霉 2--4'-苯基苯乙酮蛋白Elisa
中國臺灣根霉 苯基丁二酸饑餓Elisa
長雙歧桿長亞種 1,2,3,4-四氫喹啉環加氧1Elisa
細孢毛霉 鄰甲苯基肼鹽酸鹽環加氧2Elisa
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