詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:Rho激酶抑制劑(H-1152 dihydrochloride)
英文名稱:H-1152 dihydrochloride
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
H-1152雙鹽酸鹽是特異的高活性Rho激酶抑制劑,可滲透入細胞膜,Ki為1.6nM,對其它絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制性極低。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:871543-07-6 純度:98.0% 分子量:392.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
黑曲霉人血清總膽固Anti-VN1R4 Antibody小鼠白介18(IL-18)
米根霉人金屬硫蛋白2Anti-VPS26B Antibody小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)
蘇云金芽孢桿菌人可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1Anti-VRK2 Antibody小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)
蠟樣芽孢桿菌人3-硝基酪Anti-VSNL1 Antibody小鼠粒集落激因子(G-CSF)
枯草芽胞桿菌人糖聚糖Anti-VPS72 Antibody小鼠粒集落激因子(G-CSF)
枯草芽孢桿菌人半胱酰白三烯Anti-VRK3 Antibody小鼠間粘附分子1(ICAM-1/CD54)
膠紅酵母人鈣腔蛋白Anti-VSNL1 Antibody小鼠間粘附分子1(ICAM-1/CD54)
根瘤菌人載脂蛋白A5Anti-VTI1A Antibody小鼠胰島樣生長因子1(IGF-1)
黃硬皮馬勃人維生D結合蛋白Anti-VTI1A Antibody小鼠胰島樣生長因子1(IGF-1)
尖孢鐮刀菌人硒蛋白1Anti-VWA5A Antibody小鼠白介10(IL-10)
Oleispira antarctica人血清淀粉樣蛋白A3Anti-WASF2 Antibody小鼠白介10(IL-10)
土星漢遜酵母人鳥苷結合蛋白4Anti-WASF2 Antibody小鼠白介11(IL-11)
注水肉檢測試紙 人色b561Anti-WDHD1 Antibody小鼠白介11(IL-11)
大腸埃希菌人脂質運載蛋白2Anti-WASF4 Antibody小鼠白介15(IL-15)
赤霉菌人脂肪型脂肪結合蛋白Anti-WASF3 Antibody小鼠白介15(IL-15)
相思根瘤菌人磷脂酰肌蛋白聚糖3Anti-WDR61 Antibody小鼠17羥皮質類固(17-OHCS)
囊泡谷轉運蛋白2抗體雷氏青霉人高轉移鼻細胞
神經視錐蛋白樣1抗體神經鈣蛋白根柄白蟻傘小鼠肺成纖維細胞
維生D3受體抗體茄腐鐮刀菌(斜面)草地夜蛾卵巢細胞
囊泡相關膜蛋白相關蛋白A抗體土黃小脆柄菇抗ALV-A雞胚成纖維細胞系
Rho激酶抑制劑(H-1152 dihydrochloride)大腸埃希氏 N-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3-鈉鹽
秀珍菇 羅漢松樹脂
裂褶 鄰聯甲苯
大腸埃希氏 定堿
尖鐮孢古巴專化型 達旦黃
黑曲霉 蘿卜硫
根瘤 2-萘磺酸鈉
植物乳桿 羅丹明B
粉紅單端孢霉 半二甲橙
繩狀籃狀 六氫吡啶羧酸
太湖新鞘氨 硫酸奎寧
Bacillus 硫酸奎寧一水物
酸性藍1
簡單芽孢桿 雷帕霉
地衣芽胞桿 4-(2-吡啶偶氮)間苯二鈉鹽