詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:CDK8抑制劑(CCT-251921)
英文名稱:CCT-251921
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
CCT-251921是有效,選擇性的CDK8抑制劑;IC50值為2.3nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1607837-31-9 純度:98.70% 分子量:410.9 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
巴氏醋桿菌小鼠晚期糖基化終末產物Anti-OR2T11 Antibody人解整合樣金屬蛋白10(ADAM10)
根瘤菌人白介-5Anti-OR2T11 Antibody人解整合樣金屬蛋白10(ADAM10)
灰黃鏈霉菌蘇州亞種人白介4Anti-OR2T2 Antibody人基質金屬蛋白11(MMP11)
平菇大鼠髓系觸發受體-1Anti-OR2T29 Antibody人基質金屬蛋白11(MMP11)
Salmonella enterica subsp. indica小鼠中性粒明膠相關脂質運載蛋白Anti-OR2T35 Antibody人胸苷合成(TS)
大腸埃希菌人白介3Anti-OR2T35 Antibody人胸苷合成(TS)
根瘤菌小鼠幽門螺旋菌IgGAnti-OR2W3 Antibody人胸腺嘧啶核苷磷化(TP)
鰻斯頓氏菌大鼠膠原IAnti-OR2T3 Antibody人胸腺嘧啶核苷磷化(TP)
谷糠乳桿菌大鼠磷化蛋白激CAnti-OR2Z1 Antibody人多聚ADP核糖聚合(PARP)
貝萊斯芽孢桿菌小鼠多巴D1受體Anti-OR4A15 Antibody人多聚ADP核糖聚合(PARP)
淡黃籃狀菌人白介2可溶性受體β鏈Anti-OR3A2 Antibody人葡萄糖激(GCK)
間型莢胞腔菌大鼠磷化外信號調節激Anti-OR3A3 Antibody人葡萄糖激(GCK)
黃桿菌人白介2可溶性受體α鏈Anti-OR2Y1 Antibody人單氧化(MAO)
熒光假單胞菌小鼠腎上腺能a1A受體Anti-OR4A16 Antibody人單氧化(MAO)
釀酒酵母人白介2Anti-OR4A4P Antibody人胞漿型磷脂A2(cPLA2)
鏈格孢大鼠組織蛋白KAnti-OR4C13 Antibody人胞漿型磷脂A2(cPLA2)
環指蛋白138抗體禾頂囊殼小麥變種人乳腺導管癌細胞
RH血型C糖蛋白抗體壞損尾孢EMEM(MEM+NEAA)*培養基:
細胞周期依賴性激抑制相關蛋白抗體中田盾殼霉人急性B淋巴細胞白血病細胞
RNA結合蛋白38抗體圍小叢殼人結腸癌耐紫衫藥細胞
CDK8抑制劑(CCT-251921)嗜熱鏈球 異野漆樹苷
三葉草根瘤 Ethyl 2,4,6-trihydroxybenzoate
氣生鞘氨單胞 麥角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮
魯氏不動桿 異野漆樹苷
白孢鏈霉易毀霉亞種 Ethyl 2,4,6-trihydroxybenzoate
易變鏈霉 麥角甾-4,6,8(14),22-四烯-3-酮
運動節桿 鐵屎米酮
多殺性巴氏桿 5-Heptadecylresorcinol
球孢白僵 吐葉
兔出血癥病 鴨嘴花堿酮
Viridibacillus arenosi 豆甾-4-烯-3,6-二酮
大腸埃希 Sitoindoside I
球孢鏈霉 蛇紋石
赤曲霉 櫻桃甙;洋李甙
阿魏側耳 脫水長葉九里香內酯
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)