詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
BP-1-102 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
BP-1-102是有的轉錄因子Stat3的小分子抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1334493-07-0 純度:99.23% 分子量:626.59 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
微桿菌屬白介-17抗原(人)Anti-GRID2 Antibody人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)
蠟狀芽孢桿菌胰島Anti-GRIN1 Antibody人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)
枯草芽孢桿菌重組人胰島因子Anti-GREM2 Antibody人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)
筑波擬酵母胰島樣生長因子-II(抗原)Anti-GRIN2D Antibody人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)
膠孢胰島樣生長因子-I(抗原)Anti-GRIN2D Antibody人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)
弗雷德里克斯堡假單胞菌-3-乙偶聯牛血清白蛋白Anti-GRK3 Antibody人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)
微小鏈霉菌白介-17抗原Anti-GRIN2B Antibody人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)
彩色豆馬勃豬胰島Anti-GRK1 Antibody人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)
擴展青霉間粘附分子-2抗原Anti-GRM4 Antibody人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)
巴斯德畢赤酵母白介1α/IL-1αAnti-GRK7 Antibody人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種血藍蛋白Anti-GRK6 Antibody人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)
斑污擬盤多孔孢Ki-67Anti-GRM3 Antibody人抗軟骨抗體(anti-cartilage-Ab)
灰平鏈霉菌脂質運載蛋白Anti-GRM6 Antibody人抗人絨毛膜促性腺激抗體(AhCGAb)
釀酒酵母瘦Anti-GRM6 Antibody人抗人絨毛膜促性腺激抗體(AhCGAb)
淡紫擬青霉甲硝唑偶聯牛血清白蛋白Anti-GSC Antibody人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)
費比恩畢赤酵母與血藍蛋白偶聯物Anti-GSC2 Antibody人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)
DNA結合蛋白2抗體日本根霉人巨核細胞白血病細胞
轉錄因子蛋白SIM2抗體側耳人胰腺癌細胞(干細胞庫保藏)
鉀離子轉運蛋白3抗體綠色木霉貓星形腦膠質細胞
鈣結合線粒體載體蛋白抗體粉紅木霉彌漫性組織淋巴瘤細胞
轉錄因子Stat3小分子抑制劑(BP-1-102)硒砷芽孢桿 阿魏酸
庫德里阿茲威畢赤酵母 三聚酸
落葉松層孔 檸酸
枯草芽孢桿 肉桂酸
白靈側耳 α-溴異丁酸
赤曲霉 鎢酸
人參地土地桿 硅鎢酸
靈芝(紅芝, 赤芝) 鉬酸
異常漢遜酵母 丹寧酸
釀酒酵母 順-15-二十四碳單烯酸
普霍瓦富鹽 D-
佩特曲霉 DL-
猴頭 L-
米曲霉 1,5-二羥基萘
運動節桿 2,2-二羥基二硫代-6,6-聯萘