大鼠大隱靜脈平滑肌原代細胞

培養信息：

包被條件

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠大隱靜脈平滑肌細胞分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內側端，經內踝前方，沿小腿內側緣伴隱神經上行，經股骨內側髁后方，進入大腿內側部，與股內側皮神經伴行，逐漸向前上，在恥骨結節外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈，其匯入點稱為隱股點。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內側淺靜脈和股外側淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結扎時，須分別結扎、切斷各屬支，以防復發。大隱靜脈平滑肌細胞主要功能：①血管平滑肌細胞的生長潛力是原發血管病發的重要異常因素；②參與血管壁的炎癥反應，并與血管疾病的進展和穩定有關。因此，研究大隱靜脈平滑肌細胞的代謝和信號通路是研究大隱靜脈擴張等疾病的良好實驗材料。大隱靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠大隱靜脈平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠大隱靜脈平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

HA Others H7N2 甲型流感 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   IgG3 Others Human 人 IgG3-Fc / IGHG3 人細胞裂解液 小鼠原代腹膜間皮細胞 兔原代表皮干細胞

尾加壓素2(UST2)重組蛋白 Recombinant Urotensin 2 (UST2)

CD55 Protein Human 重組人 CD55 / DAF 蛋白

PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein

HA Protein H1N3 重組甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

RAET1E重組人 RAET1E / ULBP4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

大鼠線粒體甘油-3-0酸酰基轉移酶(GPAM)試劑盒 ，英文名： GPAM ELISA Kit

Pla vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 植物K1(VK1)試劑盒

MouseImmunoglobulin,IgAELISAKit 小鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanAlphaLactalbumin,Alpha-LaELISAKit人α乳清蛋白

細胞HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

ELISAKiths-CRP大鼠超敏C反應蛋白

小鼠血栓調節蛋白(mouse TM)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠型纖溶酶原激活物(mouse uPA)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠型纖溶酶原激活物受體(mouse uPA-R)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠血管細胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

大鼠大隱靜脈平滑肌原代細胞小鼠補體蛋白4(C4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒

HumanCreatineKinaseMBisoenzyme,CK-MBELISAKit 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7試劑盒人骨成型蛋白7(BMP-7)試劑盒規格：96T/48T

植物總吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量試劑盒(包括萃取)20次

Humansteroidproducingcellaoaibody,SCAELISAKit人抗類固醇生成細胞抗體(SCA)試劑盒規格：96T/48T

MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 Protein

IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3 0.5mgIGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗原

EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein

CPNE1 Protein Human 重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 (SUMO 標簽)

TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白