詳細介紹
商品介紹:
Monastrol是具有高效性和細胞滲透性的有絲分裂驅動蛋白Eg5的抑制劑,IC50值為14μM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:329689-23-8 別名:(±)-Monastro 純度:99.89% 分子量:292.35 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:有絲分裂驅動蛋白Eg5抑制劑(Monastrol)
英文名稱:Monastrol
產品規格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
南擬酵母Bacillus thuringiensis巨噬移動抑制因子(MIF)
產黃青霉Bacillus thuringiensis駱駝β內啡肽(β-EP)
瓶孢野野村氏菌Bacillus thuringiensis駱駝β內啡肽(β-EP)
賴芽胞桿菌屬Bacillus thuringiensis駱駝脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)
釀酒酵母橢圓變種Bacillus thuringiensis駱駝脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)
Winogradskyella eximiaBacillus thuringiensis駱駝內皮1(ET-1)
藍微褐鏈霉菌Bacillus thuringiensis駱駝內皮1(ET-1)
松柏假單胞菌閃光亞種Bacillus thuringiensis駱駝轉化生長因子β2(TGFβ2)
香菇Bacillus thuringiensis駱駝轉化生長因子β2(TGFβ2)
墻壁圣格奧爾根菌Bacillus thuringiensis馬生長激(GH)
乳球菌屬Bacillus thuringiensis馬生長激(GH)
燕麥鐮孢Bacillus thuringiensis馬主要組織相容性復合體(MHC/ELA)
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Bacillus thuringiensis馬主要組織相容性復合體(MHC/ELA)
球團灰色鏈霉菌Bacillus thuringiensis馬免疫球蛋白E(IgE)
釀膿鏈球菌Bacillus thuringiensis馬免疫球蛋白E(IgE)
枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)
核基質結合區結合蛋白1抗體戈爾德座殼孢格菲斯瓦爾德鎮磁螺菌
細胞信號轉導分子SMAD3抗體鉛色青霉魯氏少根根霉
Sema6A抗體華麗曲霉產黑普雷沃氏菌
S100A9抗體灰綠曲霉中華石花菌
有絲分裂驅動蛋白Eg5抑制劑(Monastrol)Phospho-Stathmin(Ser25) 英文名稱: 磷酸化原癌基因蛋白18 0.1ml
EPS8 英文名稱: 表皮生長因子受體底物8抗體 0.1ml
滑膜細胞凋亡抑制物1抗體 Anti-SYVN1 hu、 rat、 mo、 cattle 0.2ml
Anti-TIMP-2/FITC 熒光素標記金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-LRP6(Thr1479) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體 規格 0.1ml
Bak(BCL2 homologous antagonist/killer) Bcl-2同源拮抗劑Bak(多肽)Multi-class antibodies規格: 0.2mg