詳細介紹
商品介紹:
ReACp53是一個細胞滲透的肽,能夠抑制p53amyloid formation,緩解在癌細胞中p53的功能。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 純度:99.65% 分子量:2617.13 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
ReACp53 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
少根根霉人表面膜免疫球蛋白MBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠T活化連接蛋白(LAT)
大腸埃希菌人表面膜免疫球蛋白DBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗內膜抗體(EMAb)
地衣芽孢桿菌人殺傷免疫球蛋白樣受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗內膜抗體(EMAb)
假單胞菌屬人殺傷凝集樣受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)
昆明漢納酵母人活化蛋白CBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)
小青霉人蛋白CBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)
香菇屬人血小板因子3Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)
芽孢桿菌屬人凝血原片段F1+2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠神經膠質纖維性蛋白(GFAP)
大腸埃希菌人甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠神經膠質纖維性蛋白(GFAP)
蠟狀芽孢桿菌人膜攻擊復合物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗中性粒核周抗體(pANCA)
蘋果人優球蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗中性粒核周抗體(pANCA)
Mobilicoccus人游離血紅蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)
木霉人魚精蛋白1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)
淡黃木霉 人一氧化碳血紅蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠15脂加氧(15-LO/LOX)
嗜幾丁質類芽孢桿菌人血小板相關免疫球蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠15脂加氧(15-LO/LOX)
潮間交替紅色桿菌人血小板相關補體3Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β干擾(IFN-β/IFNB)
鋅指蛋白598抗體硬柄小皮傘家貓肺細胞
鋅指脂蛋白-1b抗體白環粘奧德蘑大額牛腎細胞
調節蛋白1抗體毛木耳恒河猴皮膚細胞
鋅指/環指蛋白1抗體潔麗香菇綿羊皮膚細胞
p53amyloid formation抑制劑(ReACp53)紫色直絲鏈霉 瑞奈
秀珍菇 瑞替加濱
節桿屬 鹽酸阿米替林
香菇 1-(4-叔丁基苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1,3-二酮
中國漢納酵母 渥曼青霉
黑曲霉 阿莫西林
干酪乳桿 霉
鹵水糖螺 尼莫地平
漢遜德巴酵母 頭孢哌酮
鐘器腐霉 他巴唑
柑橘青霉 鹽酸氨林
北京芽孢桿 去氧野艽霉鹽酸鹽
黑根霉 復達欣
歐文氏屬 喹乙
固氮 諾貝特