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神經細胞培養需要的條件
閱讀：600 發布時間：2017-7-20| 提 供 商 | 上海谷研實業有限公司 | 資料大小 | 8.9KB |
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神經細胞（神經元）不易培養，只有在適宜情況下，如接種在膠原底層上，或加入神經生長因子和膠質細胞因子時，可出現一定程度的分化，長出突起等現象，但很難使之增值。而神經膠質細胞是神經組織中比較容易培養的成分。
人、鼠等腦組織即可用于神經膠質細胞培養，不僅能獲得生長的膠質細胞，也可形成能傳代的二倍體細胞系。一般說來，膠質細胞在培養中生長不穩定，不易自發轉化，但對外界因素仍保持很好的敏感性，可用ROUS病毒和SV4等誘發轉化。
一、設備： 無菌操作設備。
二、大型設備CO2 培養箱：恒溫5%、10%CO2維持培養液中pH值。
倒置顯微鏡：用于每天觀察貼壁細胞生長情況。
解剖顯微鏡，用于準確地取材。
常溫冰箱：-4℃，用于保存各種培養液，解剖液和鼠尾膠。
低溫冰箱：-20℃--80℃，用于儲存血清酶，貴重物品和試劑。
電熱干烤箱：用于消毒玻璃器皿。
高壓消毒鍋：用于神經細胞消毒培養皿，手術器械。
過濾器：配制解剖液、培養液，必須過濾后才可使用，以去除細菌。
滲透壓儀，pH劑，天平等。
三、培養器皿及手術器械
1、培養皿：常用35mm塑料及玻璃皿，解剖取材用15mm-90mm直徑。
2、培養板，24-40孔，可用于開放培養。
3、培養瓶：
4、吸管，常用1，5，10ml，均需泡酸、洗滌、滅菌后方可使用。
5、各類培養液貯存器。
6、小型手術器械。
準備：
1、配制培養液
（1）解剖液：以無機鹽（去除Ca2+ , Mg2+）加葡萄糖配制成PBS緩沖液，保持一定的滲透壓和pH值。
（2）基礎培養基（MEM）：主要為多種氨基酸，加入葡萄糖，雙蒸餾水溶解。
（3）接種培養液：用于胰酶消化后的細胞分散，做成細胞懸液，其成分為MEM含1%谷氨酰胺，另加入10%馬血清，當天配制。
（4）維持培養液：接種后24h，全部換成此液，后每2周換一次，每次換1/2。其成分為MEM中含5%馬血清，1%谷氨酰胺，及適量的支持性營養物質。
2、培養基質 常用鼠尾膠、小牛皮膠，多聚賴氨酸，再涂膠
3、神經細胞消毒培養皿的備用。所有培養器皿均需清水沖洗2-3d，達兩次ddH2O，每遍洗刷3-4次，加塞包裝，置于烤箱中干燥消毒，于培養前1天進行。