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技術(shù)文章

制備骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本操作步驟

閱讀:426          發(fā)布時(shí)間:2017-5-9

(一)轉(zhuǎn)化細(xì)胞短期培養(yǎng)法
1.取材、培養(yǎng):從髂骨取骨髓液0.2—0.5ml,無(wú)菌注入裝有5ml培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中,37℃培養(yǎng)23—25小時(shí)后,加入秋水仙堿(終濃度為0.07μg/ml),繼續(xù)培養(yǎng)3—4小時(shí),收獲。
2.染色體制片:低滲、固定、制片及染色同實(shí)驗(yàn)一。
(二)直接制備法
1.從髂骨抽取0.3—0.5ml,立即注入濃度為0.07μg/ml的秋水仙堿的生理鹽水5ml中,以吸管輕輕吸動(dòng),將骨髓中脂肪顆粒充分吸掉,1000rpm離心8分鐘,棄上清。
2.加入同樣濃度的秋水仙堿生理鹽水2—3ml,室溫放置2—3小時(shí),離心棄上清。
3.轉(zhuǎn)化細(xì)胞染色體制片:低滲、固定、制片及染色同外周血染色體制備。
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