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干細胞制備單克隆抗體的方法是用缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶的瘤細胞變異株與脾臟的B細胞融合。采用HAT選擇性培養(yǎng)基（培養(yǎng)基中加次黃嘌呤HyPoxanthine H，氨基喋呤Aminoopterin A及胸腺嘧啶核苷Thymidine T），在這種選擇性培養(yǎng)基中，由于變異的瘤細胞不具有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶或胸腺嘧啶核苷激酶，所以不能利用培養(yǎng)基中的次黃嘌呤或胸腺嘧啶核苷而合成DNA。而只能利用谷酰胺與尿核苷酸單磷酸合成DNA，這一途徑又被氨基喋呤所阻斷，所以未融合的瘤細胞不可避免也要死亡。融合的雜交瘤細胞由于脾淋巴干細胞具有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶，可以通過次黃嘌呤合成DNA，克服氨基喋呤的阻斷，因此雜交瘤細胞大量繁殖而被篩選出來。B淋巴細胞在一般培養(yǎng)基中不能長期生長，一般于二周內(nèi)均死亡。 
單克隆抗體與常規(guī)抗體相比有如下優(yōu)點：①單一特異性，與一個抗原決定簇反應(yīng)；② 可重復(fù)性，能夠提供*一樣的抗體制劑；③一經(jīng)制出，可無*地供應(yīng)；④單克隆抗體，不一定需要純的抗原；⑤能查出混合物中存在的用常規(guī)方法查不出的少量成分干細胞。