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什么是熒光原位雜交技術

時間:2024-8-18 閱讀:962
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  什么是熒光原位雜交技術
  你知道什么是熒光原位雜交嗎?讓我們一起來看看吧!
  一、FISH的定義
  熒光原位雜交技術(FISH)是一種利用熒光信號檢測探針的原位雜交技術。它將熒光信號的高靈敏度、安全性及直觀性和原位雜交的高特異性結合起來,通過熒光標記的核酸探針與待測樣本核酸進行原位雜交。在熒光顯微鏡下對熒光信號進行辨別和計數,從而對染色體或基因異常的細胞和組織樣本進行檢測和診斷,為各種基因相關疾病的分型、預前和預后提供準確的依據。
  二、FISH的原理
  FISH分為直接法和間接法。
  直接法是在已知堿基序列的核酸探針上標記熒光素,在組織切片、間期細胞及染色體標本上與靶核酸進行原位雜交。因所形成的雜交體帶有熒光素。故可在熒光顯微鏡下直接觀察。
  間接法使用非熒光物質標記的核酸探針。如生物素或地高x等標記探針,再通過親和連接或免疫反應帶入熒光物質來檢測雜交體的存在。
  廣義上講,FISH靶序列可以是DNA或RNA,既可以用來進行基因組層面的研究,也可以進行表達層面的研究。
  目前常用的熒光素有異硫氰酸熒光素、得克薩斯紅、羅丹明及其衍生物四甲基異硫氰酸羅丹明等。
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