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北京百奧創新科技有限公司

胎牛血清如何解凍

時間:2024-1-19 閱讀:1290
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胎牛血清如何解凍

胎牛血清在生物醫學研究,以及細胞培養領域中,應用廣泛。胎牛血清含有豐富的生長因子、蛋白質和其他生物分子,對細胞生長和增殖具有重要作用。使用胎牛血清,先要將其解凍融化。融化胎牛血清時采取正確的方法非常重要,不正確的解凍過程可能會導致損壞或降低血清的有效性,影響到實驗的可重復性和準確性。那么你知道胎牛血清該如何解凍嗎?讓我們一起來看看吧!

一、解凍方法

胎牛血清中珍貴的生長因子等活性物質,它們在解凍過程中,有著與細胞復蘇類似的經歷,都需要快速解凍才能最da程度地保留生物活性。

4℃過夜這樣的長時間處理,很有可能會導致一部分的損失,影響細胞生長,為了更好地保留胎牛血清中的活性成分,使細胞培養更穩定,我們推薦使用三步法解凍胎牛血清。

 如果是儲存在-80℃的胎牛血清,則需提前幾天先轉移至-20℃冰箱中(至少24小時),再使用三步法溶解,避免溫差過大使血清失活。

階梯解凍

溫度

100ml

500ml

1

溫度15-20°C水浴

5分鐘

20分鐘

室溫

35分鐘

90分鐘

2

20°C水浴

15分鐘

25分鐘

3

37°C水浴

20分鐘

35分鐘

徹di解凍胎牛血清后,可以根據實驗需求,將其分裝,保證每一份夠一次使用量即可,比如:25ml/管、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續儲存。需要配制培養基的時候,再從-20℃冰箱中取出一管來解凍使用,可以有效避免反復凍融的問題(遵循現用現配、現配現解凍的原則)。配好的培養基可以放到4℃冰箱進行儲存。

二、常見問題

1. 胎牛血清有絮狀沉淀

把血清置于37℃中過久,或者沒有階梯解凍,還有解凍水浴時振蕩不足導致局部溫差過大等原因,都會使血清產生一些沉淀。

正確的處理方法:可以等待其自然沉降,然后取上清液使用。若比較急用、或者絮狀沉淀過于分散以至于無法取上清,可以20003000rpm離心5min。不推薦使用過濾法,血清的蛋白容易導致濾膜堵塞。熱滅活之后的血清更容易產生沉淀。

2. 熱滅活?血清熱滅活是什么,有必要熱滅活嗎?

血清熱滅活主要是為了除去對熱敏感的補體。

補體是廣泛存在于人和脊椎動物體血清及組織液中,不耐熱,活化后具有酶活性、可介導免疫應答和炎癥反應的一類蛋白質。補體的作用包括但不限于調理吞噬、裂解細胞、介導炎癥、免疫調節和清除免疫復合物等。但由于胎牛胎齡8個月以下,尚未形成完善的補體系統,對免疫實驗的影響較小,而熱滅活血清反而會使血清中的很多重要微量生長因子分解流失,因此大部分實驗不推薦熱滅活血清。

更多有關胎牛血清如何解凍的問題,請聯系北京百奧創新科技有限公司。


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