DNA提取是分子生物學研究中的關鍵步驟,它為后續的PCR、測序等實驗提供了基礎。然而,DNA提取過程中存在著一些注意事項,同時也有一些方法可以提高提取的成功率。本文將探討DNA提取的注意事項以及提高成功率的方法。
注意事項
實驗環境凈化:DNA在環境中非常容易受到污染,因此實驗室工作臺、儀器和試劑瓶口等應保持清潔,避免外源DNA的污染。
避免核酸酶污染:核酸酶能夠降解DNA,因此操作過程中需要避免使用已經接觸到核酸酶的試劑或工具。德國MB公司生產的PCR Clean,可輕松搞定分子實驗室中的核酸及核酸酶污染,即用型噴霧,噴灑在待清潔物品表面即可。
使用RNA酶(RNase):在提取過程中,使用RNase來降解RNA,以避免后續實驗中RNA的干擾。
樣本的選擇:樣本的選擇直接影響DNA提取的質量和成功率。新鮮、干凈的樣本通常更容易提取出高質量的DNA。
避免過度離心:離心過度可能導致DNA沉淀不完整,影響提取效果。
加入適量蛋白酶K:蛋白酶K可以幫助降解細胞膜和細胞壁,有助于提高DNA的釋放率。