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無(wú)論是基因治療還是細(xì)胞治療，在質(zhì)檢中都需要確保無(wú)支原體污染。PCR或qPCR常用于支原體檢測(cè)，但如用商業(yè)試劑盒，還需確保符合藥典要求，要進(jìn)行方法驗(yàn)證。近日小編向您介紹一個(gè)國(guó)外有關(guān)基因細(xì)胞治療的新發(fā)現(xiàn)，其報(bào)道發(fā)表在3月12日的Nature Communications上。

近日，大奧蒙德街醫(yī)院、倫敦大學(xué)學(xué)院GOS兒童健康研究所和哈佛醫(yī)學(xué)院之間的一項(xiàng)國(guó)際合作表明，基因治療的有益效果能在移植的造血干細(xì)胞被人體清除后數(shù)十年仍然保持。

該研究小組監(jiān)測(cè)了5名在大奧蒙德街醫(yī)院使用基因治療成功治愈SCID-X1的患者。SCID-X1即x -連鎖嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷，它是由常見(jiàn)的細(xì)胞因子受體γ鏈缺乏引起的，γ鏈?zhǔn)嵌喾N細(xì)胞因子受體(IL2、IL4、IL7、IL9、IL15和IL21)的組成部分，對(duì)淋巴細(xì)胞的發(fā)育和功能有多方面的影響。

在3-18年的時(shí)間里，研究人員定期分析了患者的血液，以檢測(cè)血液中存在哪些細(xì)胞類型和生物標(biāo)志物。結(jié)果表明，盡管作為基因治療的一部分而移植的干細(xì)胞已經(jīng)被患者清除，但矯正后的免疫細(xì)胞，即T細(xì)胞，仍在形成。

 

圖片來(lái)自：Long-term lymphoid progenitors independently sustain naïve T and NK cell production in humans. Nature Communications, 2021; 12 (1) DOI: 10.1038/s41467-021-21834-9

該基因療法的工作原理是首先移除一些患者的造血干細(xì)胞，這些干細(xì)胞可以產(chǎn)生所有類型的血液和免疫細(xì)胞。接下來(lái)，用病毒載體將一個(gè)新的缺陷基因拷貝傳送到實(shí)驗(yàn)室病人細(xì)胞的DNA中。這些矯正后的干細(xì)胞將通過(guò)所謂的“自體移植”返回患者體內(nèi)，在那里它們繼續(xù)產(chǎn)生持續(xù)的健康免疫細(xì)胞，能夠?qū)垢腥尽?/p>

在對(duì)SCID-X1的基因治療中，矯正后的干細(xì)胞最終被人體清除，但患者的病情仍然得到治愈。這組研究人員認(rèn)為，“治愈”的原因在于人體仍然能夠持續(xù)產(chǎn)生新的工程化T細(xì)胞——這是人體免疫系統(tǒng)的重要組成部分。

他們使用了先進(jìn)的基因追蹤技術(shù)和無(wú)數(shù)的測(cè)試，在基因治療幾十年后，為SCID-X1患者提供了T細(xì)胞細(xì)節(jié)。

研究小組認(rèn)為，這種基因療法為人類胸腺（T細(xì)胞發(fā)育的部位）提供了理想的條件，使其長(zhǎng)期儲(chǔ)存能夠形成新的T細(xì)胞的正確類型的祖細(xì)胞。研究人員將進(jìn)一步研究這是如何發(fā)生的，以及它是如何被利用的，這對(duì)開(kāi)發(fā)下一代的基因治療和癌癥免疫治療方法至關(guān)重要。

目前，基因療法的發(fā)展方興未艾，但它也需要進(jìn)行支原體檢查。傳統(tǒng)藥典方法如培養(yǎng)法所需時(shí)間較長(zhǎng)，qPCR方法越來(lái)越得到 基因治療公司的青睞。可使用商業(yè)的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒（如德國(guó)MB），方法驗(yàn)證后可替代傳統(tǒng)方法，節(jié)省時(shí)間，并取得同樣的靈敏度和特異性。