提起細胞培養中，牛血清的融化，大家首先想到的就是4℃過夜法。
今天小威把上流行多年的『血清融化三步法』介紹給大家，讓你知道怎樣讓你的血清，通過合適的融化，事半功倍！
與4℃過夜法相比
三步法為什么對血清更好呢？
重點有二！
其一：關系到沉淀出現的幾率！
記得嗎？血清在融化過程中，瓶子里冰塊的底部你會看見亮亮的蛋白絲在下沉，如同蜂蜜溶于水時的亮線，這就是血清中大量的蛋白在快速融化，而水的熔點高于蛋白，融化的速度是比蛋白慢的。（回想一下冰淇淋和大棒冰的區別，你懂得！）
試想，如果采用4℃過夜的方法，1瓶500毫升的血清融化好，大約需要10小時左右，蛋白先融化，沉降在瓶子的底部，水融化的速度比蛋白慢，于是造成大量蛋白溶于少量的水，此時就很容易有一些蛋白飽和析出，（大多是脂蛋白和纖連蛋白），這就是血清融化中產生沉淀的重要原因之一。
采用三步法，只要2.5個小時，溫和有效地加快了水融化的速度，另一方面，融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子，讓蛋白在瓶中混勻。
此方法不但節約了時間，而且zui大限度減少了血清沉淀出現的幾率。
其二：血清在培養細胞中，zui重要的是利用它的活性的因子，因此，融化過程中zui大限度地保留因子的活性，就變得非常重要。
回憶一下，細胞復蘇時，要保持細胞的活性，我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢？
快融！
血清同樣如此！
三步法需要兩個半小時，
4℃過夜需要大約10個小時（冰箱一般設2-8℃，所以各實驗室融化時間會稍有出入）。
哪個速度對保留活性更好？不言而喻！
三步法詳細解讀
下面，我們詳細解讀『血清的三步融化法』的步驟：
圖：剛從-28℃拿出的血清，是這個樣子的
融化血清*步
溫度：室溫
時間：100ml - 35分鐘
500ml - 90分鐘
1000ml - 100分鐘
或
溫度：15-20℃水浴（新接的自來水24℃上下）
時間：100ml - 5分鐘
500ml - 18分鐘
1000ml - 20分鐘
圖：這是zui近Ausbian血清的大區周博，在天津血研所實驗室拍到的——實驗人員三步法化血清的圖片，為了節約時間，實驗人員采取的是*步20℃水浴18min的方法。（用現接的自來水放入冰凍的血清，即可達到20℃水浴的效果。一般實驗室沒有能制冷到20℃的水浴鍋）
融化血清第二步
溫度：20℃水浴（新接的自來水24℃上下）
時間：100ml - 15分鐘
500ml - 25分鐘
1000ml - 30分鐘
圖：第二步，仍舊是新接的自來水浴，25min
融化血清第三步
溫度：37℃水浴
時間：100ml - 20分鐘
500ml - 35分鐘
1000ml - 45分鐘
圖：大家看，使用三步法融化的血清十分清亮，養細胞的效果也是棒棒噠。
注意
1.在水浴過程中，血清的平面要*浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動，使血清混勻，但不要產生泡沫!
2.胎牛血清不推薦熱滅活。
3.此三步法適用于所有品牌、所有級別的進口或國產血清，均可讓血清在減少沉淀、保留活性、提高細胞培養效果方面，得到不同程度的提高！
看到這里，你是不是迫不及待的想試試融化血清的三步法了呢？
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