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HRGEC作用原理操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
資源名稱 HRGEC作用原理
種屬 人的腎小球內皮細胞
提供形式 P1-2代凍存管
安全等級 2
培養方法
培養基 90%RPMI-1640+10%FBS
生長條件 95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度
生長特性 貼壁
存儲條件 50% RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 液氮
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
HRGEC作用原理注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。進口、國產 英文名稱: N-(γ-L-谷氨酰)-α-萘胺 N-(r-L-Glutamyl)-1-naphthylamide 含量: BR
進口、國產 英文名稱: L-亮氨酰-2-萘胺鹽酸鹽 L-Leucyl-2-naphthylamide hydrochloride 含量: BR,98%
進口、國產 英文名稱: 芐基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯 Z-ONSu 含量: BR,99%
進口、國產 英文名稱: 對氨基馬尿酸鈉 Sodium 4-aminohippurate 含量: BR,98%
進口、國產 英文名稱: 3-(2-氨乙基)吲哚 Tryptamine 含量: BR,98%
進口、國產 英文名稱: 對羥基苯乙胺鹽酸鹽 Tyramine hydrochloride 含量: BR,98%
進口、國產 英文名稱: 亞氨二醋酸/N-(羧甲基)甘氨酸 IDA 含量: BR,98%
進口、國產 英文名稱: 甘氨酰-脯氨酰-對硝基苯胺對甲苯磺酸鹽 GPDA 含量: BR,99%
進口、國產 英文名稱: 五肽促胃液素 Pentagastrin 含量: BR,98%
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