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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100mL/125mL×4 |
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貨號 | YS-02X10007 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產品名稱:腸動脈內皮細胞*培養基
規格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10007
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養基;優質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
Regucalcin/SMP30/Rgn/FITC 熒光素標記衰老標記蛋白30抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Bursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽Multi-class antibodies規格: 100mg
抗蚯溶酶抗體/抗激酶抗體 Lumbrokinase 0.1ml
Selenium Binding Protein 1 英文名稱: 硒結合蛋白1抗體 0.2ml
FOXB1 + FOXB2 英文名稱: 叉頭蛋白B1+B2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PKC gamma (Thr514) 磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體 規格 0.1ml
Bursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽Multi-class antibodies規格: 100mg
IL-3 小鼠白介素-3Multi-class antibodies規格: 48T
EPOR 紅細胞生成素受體抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh mTOR/FRAP 雷帕霉素靶蛋白抗體 規格 0.1ml
CCP(Human complement control protein) ELISA Kit 人補體調節蛋白 96T
STOM 英文名稱: 紅細胞膜蛋白STOM抗體 0.2ml
CD11b 英文名稱: 整合素αM/巨噬細胞表面分子抗體 0.1ml
EPOR 紅細胞生成素受體抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Mouse rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
FLRT2 英文名稱: 富含亮酸跨膜纖連蛋白2抗體 0.2ml
抗Ⅹ型膠原抗體 CollagenⅩ 0.2ml
Mtp53/FITC 熒光素標記突變型P53抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PIBF1/C13orf24 孕酮誘導阻斷因子1抗體 規格 0.2ml
Goat Chicken IgG/Biotin 生化羊抗雞IgGMulti-class antibodies規格: 0.1ml
腸動脈內皮細胞*培養基人體CYCLIN D1 RFLP基因分析試劑盒20次癸烷磺酸鈉
人體CYP1A2 RFLP基因分析試劑盒20次第威德合金
人體Methyl tetrahydrofolate reductase RFLP基因分析試劑盒20次人神經營養因子4(NT-4)ELISA試劑盒,NT-4 ELISA kit
人體Hemoglobin E RFLP基因分析試劑盒20次人黑色素瘤標記物(MART/Melan-A)ELISA試劑盒,MART/Melan-A ELISA
人體HLA-DPB1 RFLP基因分析試劑盒20次人轉谷氨酰酶2C多肽(TGM2)ELISA試劑盒,TGM2 ELISA kit
人體Interleukin-4-receptor alpha RFLP基因分析試劑盒20次人抗胸腺球蛋白(ATG)ELISA試劑盒, ATG ELISA kit
人體c-Ki-ras RFLP基因分析試劑盒20次人腺病IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒,ADV-IgG ELISA
人體MMP3 RFLP基因分析試劑盒20次人肽釋放酶10(KLK 10)ELISA試劑盒,
人體MMP9 RFLP基因分析試劑盒20次人丙酮酸酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒,
人體TNF-βRFLP基因分析試劑盒20次人血管抑素/血管穩定蛋白(ANG)ELISA試劑盒,
Borrelia burgdorferi RFLP基因分析試劑盒20次人ras同源物基因家族成員b(RHOB)ELISA試劑盒,
Toxoplasma gondii RFLP基因分析試劑盒20次人補體3裂解產物(C3SP)ELISA試劑盒,
Trypanosoma congolense RFLP基因分析試劑盒20次小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒,
Hepatitis B virus RFLP基因分析試劑盒20次小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒,
Human cytomegalovirus (HCMV)RFLP基因分析試劑盒20次大鼠周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒,
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