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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
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貨號 | YS-02X9569 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產品名稱:倉鼠肺細胞;CHL
規格:1×10?cells/T25培養瓶
貨號:YS-02X9569
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養基;優質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
Phospho-TIF1beta (Ser824)/FITC 熒光素標記磷酸化轉錄中介因子Tif1β抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
NPY ( Neuropeptide Y) 神經肽 Y(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
磷酸化微管相關蛋白抗體 P-Tau protein 0.1ml
phospho-SYN1(Ser62+Ser67) 英文名稱: 磷酸化神經突觸素1抗體 0.1ml
phospho-Ephrin B (Tyr316) 英文名稱: 磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-LKB1(Thr189) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體 規格 0.1ml
NPY ( Neuropeptide Y) 神經肽 Y(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
PAX9(Paired box gene 9) 配對盒基因9抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
ATG7 自噬相關蛋白7抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-AP2M1 (Thr156) 磷酸化接頭相關蛋白復合體AP-2μ鏈1抗體 規格 0.1ml
PSA 1:150 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Ube2L6 英文名稱: 泛素載體蛋白L6抗體 0.2ml
Dihydropyrimidinase 英文名稱: 二氫嘧啶抗體 0.2ml
ATG7 自噬相關蛋白7抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
SDF1 beta 英文名稱: 基質細胞衍生因子-1抗體 0.1ml
EDC4 英文名稱: 自身抗原EDC4抗體 0.2ml
分泌素抗體 Secretin 0.2ml
P-Tau protein (pThr489)/FITC 熒光素標記磷酸化微管相關蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MEF2C(Thr300) 磷酸化肌細胞增強因子2C抗體 規格 0.1ml
IRS-3 胰島素受體底物-3(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
倉鼠肺細胞;CHL3-磺炳基十六烷基二甲甜菜堿牽牛子體液羥脯(HYP)比色法定量檢測試劑盒
聚氧乙烯月桂(Brij-35);Brij™ L23香加皮羥(HYP)高效液相色譜定量檢測試劑盒
十二烷基硫酸鋰一味 羥脯(HYP)終點比色法定量檢測試劑盒
諾納德® P-40穿山甲脯氨肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測試劑盒
硫代甜菜堿 8桔梗組織脯氨肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測試劑盒
硫代甜菜堿 10益智體液脯肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測試劑盒
硫代甜菜堿 12蛇床子脯肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測試劑盒
恩他卡朋;COMT抑制劑鹿茸(梅花鹿)酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法定量檢測試劑盒
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