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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級會(huì)員 | 第10年

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肺癌細(xì)胞;NCI-H460

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-03-21 19:56:42瀏覽次數(shù):308次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-02X9803 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用
肺癌細(xì)胞;NCI-H460公司正在銷售的產(chǎn)品:6號(hào)染色體開放閱讀框182抗體Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1059) 磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體
6號(hào)染色體開放閱讀框186抗體Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1175) 磷酸化血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體
6號(hào)染色體開放閱讀框191抗體Anti-phospho-VEGF

細(xì)胞特性:

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱:肺癌細(xì)胞;NCI-H460

規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào):YS-02X9803

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長良好,形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

91.jpg 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng):

1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;

2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。

3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。

4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。

5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟:

一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。

(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。

Pdk4/FITC 熒光素標(biāo)記丙酮酸脫氫酶激酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Donkey  Goat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗羊IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml

抗內(nèi)膜抗體  EMAb 0.2ml

Donkey  Goat IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml

FADD 英文名稱: Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr231) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Donkey  Goat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗羊IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml

XRCC1(X-ray Repair Cross Complementing 1) X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白/細(xì)胞堿基切除修復(fù)基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

 phospho-Beta-catenin(Tyr142) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCDHGB5 原鈣粘蛋白γB5抗體 規(guī)格 0.2ml

CDH1 Kit Human 人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 ELISA配對抗體 ELISA

THSD1 英文名稱: 血小板跨膜反應(yīng)蛋白1抗體 0.2ml

Phospho-cdc2 (Tyr15) 英文名稱: 磷酸化周期素依賴激酶2抗體 0.1ml

 phospho-Beta-catenin(Tyr142) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rabbit  human IgM 兔抗人IgM 1mg

C9orf59 英文名稱: 9號(hào)染色體開放閱讀框59抗體 0.2ml

缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體  HIF-1α 0.1ml

 PKN2 /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶N2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ROCK1(Thr455/Ser456) 磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

Human Fibrinogen (親和純化)人纖維蛋白原Multi-class antibodies規(guī)格: 10mg
肺癌細(xì)胞;NCI-H460硫酸腺嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品)西瑞香素抗原譜學(xué)分析技術(shù)試劑盒

6-氯咪唑并[1,2-b]噠喜樹堿SELDI蛋白質(zhì)譜分析技術(shù)試劑盒

磷酸腺嘌呤,B4細(xì)辛高容量熒光篩選技術(shù)試劑盒

細(xì)辛脂素高通量遠(yuǎn)紅外篩選技術(shù)試劑盒

鳥嘌呤 夏佛塔苷高效液相色譜(HPLC)分析

鳥嘌呤 (標(biāo)準(zhǔn)品)仙茅苷紅外光譜(ESR)分析

N-芐基吡咯烷-3-甲酸甲酯腺苷熒光定量分析

5-溴-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶相思豆堿紫外可見光分析

 


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