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中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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胰酶不能去除對(duì)原代細(xì)胞影響的原因

時(shí)間:2017-10-23閱讀:2443
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原代細(xì)胞消化時(shí),如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,不去除是沒有問題的。
如果消化液中含有胰酶和EDTA,去除。EDTA是一種化學(xué)螯合劑,主要作用在于能螯合Ca、Mg離子,使細(xì)胞分離。但EDTA不能被血清中和,消化后要*清洗去除,否則細(xì)胞易脫壁。胰酶胰酶和EDTA聯(lián)合使用可提高消化效率,所以常二者合用。
胰酶的保存
胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時(shí)間延長,胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存,在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長期保存。
商品化胰酶溶液需要用干冰運(yùn)輸,在運(yùn)輸過程中,胰酶溶液中的二氧化碳與干冰揮發(fā)的二氧化碳可能會(huì)極少部分的氣體交換,導(dǎo)致溶液PH的漂移。有些胰酶溶液里含有酚紅作為PH值指示劑,因此胰酶PH的變化是肉眼可觀察到的。由干冰運(yùn)輸過程中導(dǎo)致的PH值的變化很小,PH值會(huì)從7.2-8.0變化到了6.8左右,在PH值7.2-8.0的時(shí)候,溶液呈淡紅色;PH值6.8左右時(shí)呈淡黃色的。因此胰酶顏色的變化是由PH值的變化引起,歸因于使用干冰運(yùn)輸。這種顏色的變化是行業(yè)普遍現(xiàn)象,原代細(xì)胞在不同供應(yīng)商的胰酶產(chǎn)品都會(huì)出現(xiàn)。
HPLC≥97%    Crocin I    20mg/支    西紅花苷I
HPLC≥98%    Crocin II    20mg/支    西紅花苷II
HPLC≥98%    Morin    20mg/支    桑色素
≥98%    D-(−)-Quinic acid    20mg/支    D-(-)-奎寧酸
HPLC≥98%    catalpol    20mg/支    梓醇
HPLC≥99%    phloridzin    20mg/支    根皮苷
HPLC≥98%    Ecdysterone    20mg/支    蛻皮激素
HPLC≥98%    6-gingerol    20mg/支    6-姜酚(姜辣素)
HPLC≥90%    Z-Ligustilide    20mg/支    蒿本內(nèi)酯
HPLC≥98%    1-Deoxynojirimycin    20mg/支    脫氧野尻霉素(DNJ)
原代細(xì)胞

 

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