成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

上海研生實業有限公司
中級會員 | 第10年

15201736385

elisa酶聯免疫試劑盒
生化試劑
PCR試劑盒
細胞
標準品
PCR檢測試劑盒
質粒
定量PCR試劑盒
生化檢測試劑盒
科研細胞
天然蛋白、重組蛋白
抗體

如何檢測細胞株污染的首要威脅

時間:2017-8-14閱讀:336
分享:

細胞株污染是世界細胞庫面臨且長期存在的一大問題。每年都會由于細胞污染導致數萬美元的損失。

而在這些污染之中, 支原體污染是首要威脅。支原體是廣泛存在于自然界中能獨立生活的zui小微生物, 直徑300~800 nm, 能在細胞內繁殖, 且細胞壁的缺乏使其對常見抗生素如青霉素和鏈霉素具有更高的耐受性, 其靈活、小規模和多態性使它更容易透過0.22~0.45 μm濾膜。自1956年Robinson等*次報道支原體污染以來, 世界各地實驗室細胞庫開始重視并檢測細胞中是否存在支原體污染。有文獻指出, 細胞培養過程中, 支原體感染發生率高達30%~60%。因此, 及時、準確地檢測出所培養的細胞是否有支原體污染至關重要。污染細胞的支原體主要有人源、豬源和牛源三類, 大部分是發酵支原體(Mycoplasma fermentants)、豬鼻支原體(M. hyorhinis)、口腔支原體(M. orale)、精氨酸支原體(M. arginini)、梨支原體(M. pirum)、唾液支原體(M. salivarium)、萊氏無膽甾支原體(Acholeplasmalaidlawii)和人型支原體(M. hominis)。

支原體污染會影響細胞的形態、功能、代謝、細胞膜、生長速率、誘導染色體畸變、細胞內信號傳導等各種細胞特性。受支原體污染的細胞在培養時培養基的pH值不會發生改變, 也不會渾濁,因此, 很難直接觀察出細胞是否受到污染。常用的支原體檢測方法有培養法、DNA熒光染色法、酶聯免疫吸附法和PCR法等。

1. 培養法

培養法是zui傳統的檢測方法, 該方法能直觀地顯示是否存在支原體污染。將細胞培養物置于PPLO肉 湯 培 養 基(pleuropneumo-nia-like organismsbroth base)中, 37 °C培養3天后離心, 將沉淀物轉移至PPLO瓊脂培養基相同條件下培養4~6周, 觀察是否有“煎雞蛋”樣菌落出現, 若有即為支原體污染。

這種方法簡單易行, 但耗時比較長, 且存在不少缺陷。支原體由于遺傳缺陷, 導致某些代謝途徑缺失, 其生長很大程度依賴于培養基的成分。在
配制培養基時, 任何成分質量或批次的不同都會影響支原體的生長, 從而影響檢測的靈敏度。不同的生長條件(如好氧、厭氧、微氧等)也會影響檢測結果, 易導致假陽性。此外, 還有許多支原體無法培養, 因此, 使用培養法的檢測結果并不全面。

2. DNA熒光染色法

DNA熒光染色法是基于使用熒光染料DAPI或Hoechst 33258的細胞化學染色法。熒光染料能選擇性的結合細胞和支原體DNA的小溝, 因此, 細胞株在準備過程中, 任何存在的DNA均會被染色且DNADAPI復合物吸收波長為340~488nm。將待測細胞單層培養至70%~90%匯合度時, 用細胞刮刀收取, 以5×104/mL~1×105/mL濃度轉接至蓋玻片上培養12~24小時, 用無菌磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌, 并在37 °C下用DAPI-甲醇溶液染色15分鐘, 無菌水洗滌
并烘干后置于檸檬酸緩沖液(pH5.5)?甘油(2?1)條件中, 用指甲油密封。處理后的玻片置于熒光顯微鏡下觀察, 被支原體污染的細胞經染色后, 細胞核外與細胞周圍可看到許多大小均一的熒光點。
常溫,避光    UV法含量測定    *:    萘普生    規格:    100mg
常溫,避光    含量測定    *:    潑尼松    規格:    100mg
常溫,避光    含量測定    *:    青蒿琥酯    規格:    50mg
常溫,避光    含量測定    *:    氫溴酸右美沙芬    規格:    100mg
常溫,避光    UV法含量測定    *:    舒必利    規格:    100mg
常溫,避光    含量測定    *:    沙丁胺醇    規格:    100mg
細胞株

 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 国产 精选 bt 天堂| 性色AV一区二区三区咪爱四虎| 国产又黄又猛又粗又爽的A片漫| 欧美亚洲国产精品自拍| 亚洲精品久久久久久久观看| 欧美 亚洲 国产 一区| 147人体做爰大胆视频| 国产SUV精品一区二区88L| 真实露脸国产熟妇熟年妇人视频| 丁度电影乳情欲乱| 激情射精爽到偷偷C视频无码| 在线va无卡无码高清| 久久高清一级毛片| 国产精品亚洲原创| 亚洲精品久久无码一区二| 韩国理伦电影免费| 香港三日本三级少妇三级66| 精尽人亡乱肉合集乱500小说| 欧美性生交大片免费看A片免费| 国产精品久久人妻无码网站一区无| 亚洲AV久久无码精品九号| 色妞色视频一区二区三区四区| 欧美日韩亚洲激情| 久久精品动漫网一区二区| 久久久久久成人av| 色哦色哦哦色天天综合| 国产午夜精品一区二区三区四区| 亚洲精品久久黄大片| 边吃奶边狠狠躁日韩A片| 亚洲综合AV色婷婷五月蜜臀| 51吃瓜网今日吃瓜资源| 麻豆国产精品福利| 午夜久久久麻豆国产精品| 婷婷丁香五月激情综合站| 欧美日韩精品一区二区三| 一区国产传媒国产精品| 国产一级无码毛片精品| 少妇高潮毛片免费看A片| 9999国产精品欧美久久久| 亚洲成a人v欧美综合天堂,| 欧美一区二区三区四区精品|