腫瘤細(xì)胞在培養(yǎng)過程中如果環(huán)境不適合其生長就會出現(xiàn)部分細(xì)胞的老化現(xiàn)象。這是干細(xì)胞培養(yǎng)的一個(gè)難點(diǎn)也是經(jīng)常出現(xiàn)的問題。本文描述干細(xì)胞老化時(shí)出現(xiàn)的跡象，以及其預(yù)防措施。
干細(xì)胞老化的表現(xiàn)
★ 細(xì)胞胞漿內(nèi)特別是在核區(qū)附近出現(xiàn)黑色顆粒，表示細(xì)胞開始出現(xiàn)老化；
★細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡，則表明該細(xì)胞已老化或者已經(jīng)開始分化（在全部細(xì)胞中出現(xiàn)少數(shù)老化細(xì)胞是正常的）；
★ 細(xì)胞立體感逐漸消失，細(xì)胞間的間隔不清，部分細(xì)胞扁平狀，細(xì)胞的形狀趨向多樣；
★ 貼壁性減退，出現(xiàn)一些漂浮的細(xì)胞；部分分泌強(qiáng)的細(xì)胞分泌物增多，細(xì)胞表面會比較臟；
★ 細(xì)胞增殖速度明顯下降，分裂相的細(xì)胞明顯減少。
干細(xì)胞老化的原因和預(yù)防
1) 接種密度的影響：部分干細(xì)胞具有一定的分泌性能，能夠分泌一些對細(xì)胞有支持能力的因子類物質(zhì)；所以必須維持一定的接種密度，否則會導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增殖減慢，zui后出現(xiàn)老化；
2) 消化過度：消化細(xì)胞時(shí)會對細(xì)胞的表面蛋白有較強(qiáng)的損傷，所以消化的時(shí)間不能過長，使用合適濃度和pH 值的消化酶，否則會導(dǎo)致細(xì)胞老化和分化；
3) 合適的密度的時(shí)候就要傳代：細(xì)胞如果過密，接觸抑制作用會導(dǎo)致細(xì)胞的活力減弱并影響增殖導(dǎo)致老化；
4) 使用合適的血清和培養(yǎng)基：不同的干細(xì)胞對培養(yǎng)基特別是血清的要求不同，所以使用不同的培養(yǎng)用的血清進(jìn)行篩選，尋找該干細(xì)胞培養(yǎng)的血清是預(yù)防細(xì)胞老化，維持腫瘤細(xì)胞正常生長的重要保證。