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A7R5;大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞使用說明書

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A7R5;大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞使用說明書:
免疫類型:    不祥
物種來源:    哺乳動物
相關(guān)疾病:    無
組織來源:    新鮮
品系:    ATCC CRL-1444
細(xì)胞類型:    培養(yǎng)到穩(wěn)定期后細(xì)胞表現(xiàn)出長高的肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性(CPK)。 細(xì)胞分裂終止后合成骨肉型CPK。
數(shù)量:    現(xiàn)貨
規(guī)格:    T25
細(xì)胞接受后處理
1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
 
 2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
 
 3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
 
 4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及 時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
 
 5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉谩?br /> 
一.貼壁細(xì)胞  
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。 
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

二.懸浮A7R5;大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞 
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

三.2ml小管操作方法。 
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)。
2. 嚴(yán)格無菌操作,用吸管吸出管中細(xì)胞至6ml*培養(yǎng)基混勻。
3.換新的A7R5;大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO7  培養(yǎng)。

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