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如何判斷原代細胞污染了?

時間:2018/4/10閱讀:4170
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狀態 1:原代細胞培養液變渾濁了,經常見到是米湯樣,黃色液體,一般認為細菌污染。
狀態 2:細胞培養基內含有能動的小黑點,一般認為是黑膠蟲。
狀態 3:胞培養基清亮,但是能看到飄在培養液帶有毛毛的白色的菌狀物質,有可能就是真菌感染。
策略:細胞污染了就直接扔了,還得把培養箱用酒精棉球擦干凈,并用紫外照射半小時,防止再次污染。同時建議細胞培養時,在培養基中加入青鏈霉素 (尤其是初學者)
細胞培養過程中,細胞周圍包括細胞上有很多小黑點,怎么辦?
策略 1:用胰酶消化下來后,低速短時間離心,不同實驗室不一樣,如果平時是 1 000 轉 5 min 的話,就可以改為 700 轉 3 min,用新的培養瓶培養細胞,細胞收集是少一點,但是一般都能干凈很多。多傳幾代就好多了。
策略 2:如果多次嘗試之后還是不干凈,就懷疑是否存在支原體污染了,用抗支原體藥就 OK 了。一般用上 3~5 天,細胞就干干凈凈了。
細胞培養過程中,發現貼壁細胞表面沾了很多死細胞,傳代過程中一直存在怎么破?
有一招屢試不爽,那就是用 PBS 洗兩遍之后,加胰酶進去,晃一晃,迅速將胰酶倒出,再用 PBS 洗一下,再加胰酶正常消化。死細胞由于粘附能力很弱,*次加胰酶進去以后會掉下來,第二次加胰酶下來的細胞才是活性比較強的原代細胞。整完一次之后,再次傳代方法同上,一般 2~3 次之后,細胞就完好如初了。
效價測定    FSH190IU、LH242IU/支    150524-200503    人絕經尿促性素(HMG)
效價測定    21IU/支    050529-200902    縮宮素(合成)
免疫測定用    600μIU    150530-0312    促甲狀腺素(TSH)
免疫測定用    930mIU    150531-201003    促黃體生成激素(LH)
免疫測定用    9mIU/支    150532-0004    泌乳素
免疫測定用    450mIU/支    150533-0212    促卵泡生成素
免疫測定用    1.22mIU/0.61ug/支    534-9604    生長激素
免疫測定用    240ng/0.5ml/支    150535-201002    人絨毛膜促性腺激素β亞單位
原代細胞

 

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