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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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磷酸二酯酶5A(PDE5A)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-17 10:35:19瀏覽次數(shù):314次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D2066 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Phosphodiesterase 5A, cGMP Specific (P
物種 Homo sapiens (Human,人)
磷酸二酯酶5A(PDE5A)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:細(xì)胞角蛋白15抗體 英文名稱:CK15 0.1ml細(xì)胞角蛋白14抗體 英文名稱:CK14+17+42+10 0.1ml促胃泌素受體抗體 英文名稱:CCKBR 0.1ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

透明質(zhì)酸氨基葡糖苷酶1(HYAL1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Hyaluronoglucosaminidase 1 (HYAL1)LUCA1; NAT6; Hyaluronidase-1; Lung carcinoma protein 1物種:Mouse,小鼠

肝脂酶(LIPC)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)HL; HTGL; Hepatic Lipase; Hepatic triacylglycerol lipase; Lipase member C物種:Mouse,小鼠

解整合素金屬12(ADAM12)重組蛋白英文名稱:Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 12 (ADAM12)MCMP; MCMPMltna; MLTN; MLTNA; Meltrin Alpha; Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 12物種:Human,人

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

磷酸二酯酶5A(PDE5A)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D2066

 

 

英文名稱:Recombinant Phosphodiesterase 5A, cGMP Specific (PDE5A)

CGB-PDE; cGMP-binding cGMP-specific phosphodiesterase; cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase

型號(hào):GOY-01D2066

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量:41.3kDa

實(shí)際分子量:42kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Glu536~Gln860 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 80%

等電點(diǎn):6.9

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞英文名稱:BHK-21

長(zhǎng)春堿 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR Vinblastine Sulfate

 人結(jié)腸長(zhǎng)春新堿耐藥株英文名稱:HCT-8/V?

長(zhǎng)春堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Vinblastine Sulfate

 克雷伯氏顯色培養(yǎng)基250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

替莫唑 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Temozolomide

 四鈉亮綠增菌液/四鹽煌綠增菌液基礎(chǔ)/TTB沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

長(zhǎng)春堿(進(jìn)分) 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分Sigma V1377 Vinblastine Sulfate

 UVM添加劑/UVM Supplement添加到HB4195中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)10毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

替莫唑(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Temozolomide

 3.5%鈉三糖鐵/3.5% NaC1 TSI Agar副溶血弧菌生化試驗(yàn)鑒別250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP30,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Aminoglutethimide

 人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Aminoglutethimide

 小鼠子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

氟他 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP29 Flutamide

磷酸二酯酶5A(PDE5A)重組蛋白人P0蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒

大鼠α-輔肌動(dòng)蛋白1(ACTN-1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

1瓶 CHL細(xì)胞株 CHL 低溫運(yùn)輸和保存

2 ug pMAL-p5E pMAL-p5E 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

小鼠白介素25(IL25/C19orf10)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

2 ug pmCherry-GFP-LC3 pmCherry-GFP-LC3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50T 溶血性鏈球菌ACR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

MiddleBrook7H10瓊脂 MiddleBrook7H10 Agar 250g

0.1mL 綠如藍(lán)染料,PCR級(jí) DNAGREEN, PCR Grade -20℃保存

人血小板激活因子乙酰水解2,細(xì)胞質(zhì)(PAFAH2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

2000 U 限制性內(nèi)切BamHI Restriction Endonuclease -20℃保存

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