蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶(hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Carnitine Acetyltransferase (CRAT)

CAT1; Carnitine O-Acetyltransferase; Carnitine acetylase

型號(hào)：GOY-01D1959

酶與激酶

代謝通路

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：-

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

髓過(guò)氧化物酶(MPO)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Myeloperoxidase (MPO)酶與激酶物種：Cattle，牛

γ-谷氨酰水解酶(gGH)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Gamma-Glutamyl Hydrolase (gGH)GH; conjugase, folylpolygammaglutamyl hydrolase; Gamma-Glu-X carboxypeptidase物種：Human，人

鈣3(CAPN3)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Calpain 3 (CAPN3)CANPL3; p94; LGMD2; LGMD2A; nCL1; Calcium-activated neutral proteinase 3; Muscle-specific calcium-activated neutral protease 3; New calpain 1物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

環(huán)指蛋白16抗體 TRIM17/RNF16 0.2ml

麻瘋病和帕金森氏病共同調(diào)節(jié)蛋白抗體 PACRG 0.2ml

免j鏈抗體 Igj 0.2ml

水蛭素抗體 Hirudin 0.2ml

自噬相關(guān)蛋白4B抗體 APG4B/AUTL1 0.2ml

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框39抗體 C3orf39 0.2ml

乳腺癌相關(guān)蛋白1抗體 BIN2/BRAP1 0.2ml

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體 C11orf53 0.2ml

FAM83F蛋白抗體 FAM83F 0.2ml

原鈣粘附蛋白18抗體 PCDH18 0.2ml

驅(qū)動(dòng)蛋白2抗體 KLC1/KNS2 0.2ml

軸蛋白1抗體 Axin1 0.1ml

肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CRAT)重組蛋白小鼠肺炎克雷伯氏菌   

焦曲霉   

大腸桿菌   

天藍(lán)色鏈霉菌   抑制陽(yáng)性細(xì)菌，產(chǎn)生石蕊殺菌素和鏈絲蘭素。

糖化酵母   

金黃色亞種   抗生素敏感試驗(yàn)質(zhì)控菌株

擬康氏木霉   

登佐鏈霉菌   模式菌株，

酪丁酸梭菌   產(chǎn)丁酸

靈芝(紅芝，赤芝)   

黃綠綠僵菌   生物防治用菌。

釀酒酵母   食用酵母。

運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌   產(chǎn)灑精