蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)

LYAG; Acid Alpha-Glucosidase; Lysosomal Alpha-Glucosidase; Pompe Disease Glycogen Storage Disease Type II; Acid Maltase; Aglucosidase Alfa

型號：GOY-01D1310

酶與激酶

代謝通路

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：溶酶體

預測分子量：22.7kDa

實際分子量：23kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Val755~Ser953 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：5.6

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

產品名稱：ADP核糖轉移酶5(ART5)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant ADP Ribosyltransferase 5 (ART5)

產品名稱：5-甲基四氫高半甲基轉移酶還原酶(MTRR)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant 5-Methyltetrahydrofolate Homocysteine Methyltransferase Reductase (MTRR)

產品名稱：N-乙酰合酶(NAGS)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱：Recombinant N-Acetylglutamate Synthase (NAGS)

產品名稱：小泛素相關修飾蛋白3(SUMO3)重組蛋白  物種：S. cerevisiae (Yeast，酵母)  英文名稱：Recombinant Small Ubiquitin Related Modifier Protein 3 (SUMO3)

產品名稱：激活亞基4(PSME4)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Proteasome Activator Subunit 4 (PSME4)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

激酶A抗體 TrkA

端粒體復制結合因子1抗體 TRF1

腫瘤壞死因子受體相關因子1抗體 TRAF1

腫瘤壞死因子受體相關因子2抗體 TRAF2

微管相關蛋白抗體 Tau protein

Tar DNA 結合蛋白43抗體 TARDBP

細胞粘合素(固生蛋白)抗體 Tenascin C

三葉肽因子3抗體 TFF3

轉移生長因子α抗體(TGFα) TGF alpha

轉化生長因子β1抗體（TGFβ1） TGF Beta 1

組織因子途徑抑制劑-2抗體 TFPI-2

轉移生長因子β2抗體（TGFβ2） TGF beta 2 Propeptide

酸性葡糖苷酶α(GaA)重組蛋白小鼠Baicalin 5g瓶

兔抗山羊IgG-HRP0.1ml支

錳營養培養基/Manganese Nutrient Agar Medium250克國產/進口

疊氮鈉葡萄糖肉湯/Azide Dextrose Broth鏈球菌、腸球菌、糞鏈球菌的增菌培養250克國產/進口

Thormley氏雙水解酶培養基/雙水解酶試驗用培養基/AD細菌水解試驗，用于假單胞菌屬鑒別；弧菌的試驗5克國產/進口

非洲綠猴腎細胞英文名稱：VERO

LLC(小鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2

膠片8×10盒

Ammonium Persulfate 過銨100g瓶

結腸轉移關聯基因1(MACC1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Metastasis Associated In Colon Cancer 1 (MACC1)

髓過氧化物酶(MPO)重組蛋白英文名稱：Recombinant Myeloperoxidase (MPO)

骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)重組蛋白英文名稱：Recombinant Bone Morphogenetic Protein Receptor 1A (BMPR1A)

科瑪嘉念珠菌顯色培養基 規格： 1000ml/瓶 用途： 念珠菌計數