蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)

LOX15; 15-LOX2; 15-LOX1; 15-LOX; 12-LOX; ALOX15; 15-LO; 15-LPG; LOG15; Lipoxygenase 15; Arachidonate 12-lipoxygenase, leukocyte-type; Arachidonate omega-6 lipoxygenase

型號：GOY-01D368

酶與激酶

代謝通路

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：17.3kDa

實際分子量：17kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Lys170~Leu312 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：5.2

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Monoamine Oxidase B (MAOB)  產(chǎn)品名稱：單氨氧化酶B(MAOB)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 21 (MMP21)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬21(MMP21)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Myosin Light Chain Kinase 2 (MYLK2)  產(chǎn)品名稱：肌球蛋白輕鏈激酶2(MYLK2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Phosphofructokinase, Platelet (PFKP)  產(chǎn)品名稱：血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Tyrosine Kinase 2 (Tyk2)  產(chǎn)品名稱：激酶2(Tyk2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Fyn Related Kinase (FRK)  產(chǎn)品名稱：Fyn相關(guān)激酶(FRK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

DDX4抗體 DDX4

DDX58抗體 DDX58

鴨瘟病毒DPV抗體 Duck plague virus

交聯(lián)二聚體抗體 D-DIMER

腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體 Drebrin

DNA斷裂因子抗體（激活脫氧核糖核酸酶） DFFB

脫氧核糖核酸酶γ抗體 DNase gamma

死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體 DATF1

脫氧核糖核酸酶2抗體 DNase II

細(xì)胞死亡防衛(wèi)蛋白1抗體 DAD1

脫氧核糖核酸酶1抗體 DNase I

Duffy血型趨化因子受體抗體 DARC

花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白人地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

桔橙小單孢菌 Micromonospora aurantiaca

胰(含100mL 酶解緩沖液)10mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae紫色變異鏈霉菌 Streptomyces violovariabilis

NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系檸檬綠木霉

猴菌豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶蘇云金芽胞桿菌東北亞種 Bacillus thuringiensis subsp. tohokuensis

茯苓 Poria cocos

單核細(xì)胞增生李氏桿菌 Listeria monocytogenes

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii木瓜(含10mL酶解緩沖液)

普雷恩毛霉 Mucor prainii楊奇青霉 Penicillium janczewskii

香菇 Lentinula edodes尖孢鐮刀菌棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum

植物桿菌 Lactobacillus plantarum涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis