蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)

CA-II; CAII; Car2; CAC; Carbonate dehydratase II; Carbonic anhydrase C

型號：GOY-01D329

酶與激酶

腫瘤免疫

骨骼代謝

物種：Chicken (Gallus，雞)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：30.5kDa

實際分子量：28kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Met1~Gln260 (Accession # P07630) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Topoisomerase I (產品名稱：拓撲異構酶Ⅰ重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Aminoadipate Semialdehyde Phosphopantetheinyl Transferase (AASDHPPT)  產品名稱：氨基乙二酸半醛磷酸泛酰巰基乙胺基轉移酶(AASDHPPT)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Adenosine Kinase (ADK)  產品名稱：腺苷激酶(ADK)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Aminolevulinate Delta Dehydratase (ALAD)  產品名稱：氨乙酰丙酸δ脫水酶(ALAD)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Butyrylcholinesterase (BCHE)  產品名稱：丁酰酯酶(BCHE)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Calpain 2 (CAPN2)  產品名稱：鈣2(CAPN2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

周期素B2抗體 Cyclin B2

細胞凋亡誘導蛋白NALP3抗體 Cryopyrin

鈣腔蛋白 Calumenin

6號染色體開放閱讀框222抗體 C6orf222

熱休克蛋白58抗體 Cornulin

 P450 17A1抗體 Cytochrome P450 17A1

膜蛋白CLDND1抗體 CLDND1

二氫嘧啶酶相關蛋白1抗體 CRMP1

CD98重鏈抗原抗體 CD98

鈣抑制蛋白抗體 Calpastatin

氯單克隆抗體 Chloramphenicol

cGMP依賴性蛋白激酶1抗體 cGKI

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白雞293A (人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2

尖孢鐮刀菌棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum香菇 Lentinula edodes

大鼠卵巢上皮細胞培養基淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum小鼠子宮成纖維細胞培養基

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosusCa Ski, 人宮頸細胞

人胎盤絨毛膜細胞培養基嗜熱棲熱菌 Thermus thermophilus

異常漢遜酵母 Hansenula anomala毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

小鼠黑色素瘤細胞檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

酒假絲酵母 Candida kefyr金色產色鏈霉菌 Streptomyces aureochromogenes

RWPE1(人前列腺上皮細胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

委內瑞拉鏈霉菌 Streptomyces venezuelae人肺細胞

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人前列腺成纖維細胞培養基

MDA-MB-157(人腺細胞)葡萄球菌屬 Staphylococcus sp