蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Toll Like Receptor 4 (TLR4)

CD284; TOLL; HToll

型號：GOY-01D315

信號轉導

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

肺臟病學

物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：-

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Serine/Threonine Kinase 39 (STK39)  產品名稱：/激酶39(STK39)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 10 (PSMD10)  產品名稱：非ATP酶體26S亞基10(PSMD10)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Coupling Factor 6 (CF6)  產品名稱：耦合因子6(CF6)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Coupling Factor 6 (CF6)  產品名稱：耦合因子6(CF6)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Aldehyde Oxidase 1 (AOX1)  產品名稱：乙醛氧化酶1(AOX1)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4)  產品名稱：鈉/鉀離子轉運ATP酶β4肽(ATP1b4)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

聚合酶3抗體 CSGLCAT

β1/β-1,4-GalNAc-T抗體 CSGALNACT1

胎盤催乳素1/2抗體 Placental lactogen I+II

激酶C-SRC抗體 CSK

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酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗體 CSNK1A1L

半延伸蛋白α抗體 CSP

磺基轉移酶CSPS抗體 CSPS

軟骨酸性蛋白1抗體 CRTAC1

富含半蛋白結合蛋白抗體 CSRP2BP

富含半蛋白2抗體 CSRP2

CREB調節轉錄激活因子3抗體 CRTC3

Toll樣受體4(TLR4)重組蛋白牛人腺上皮細胞培養基100mL

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis人氣管平滑肌細胞培養基

木糖氧化產堿桿菌 Alcaligenes xylosoxidansEA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis人胰島β細胞培養基

INS-1(大鼠胰島細胞瘤細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

香菇 Lentinula edodes香菇 Lentinula edodes

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

K562/慢性髓性白血病細胞Stripping Buffer/蛋白印跡膜再生液

雙孢蘑菇MDA-MB-453(人腺細胞)

球毛殼 Chaetomium globosum熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

人肝內膽管上皮細胞培養基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae