產品屬性：

產品名稱：亮氨酰氨基肽酶(LAP)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Leucine Aminopeptidase (LAP)

LAPEP, LAP3; PEPS; Peptidase S; Leucyl Aminopeptidase; Cytosol aminopeptidase; Proline aminopeptidase; Prolyl aminopeptidase

型號：GOY-01D215

酶與激酶

代謝通路

發育科學

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：35.1kDa

實際分子量：35.1kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Pro206~Arg496 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

11號染色體開放閱讀框53抗體 C11orf53

11號染色體開放閱讀框24抗體 C11orf24

11號染色體開放閱讀框57抗體 C11orf57

11號染色體開放閱讀框65抗體 C11orf65

11號染色體開放閱讀框71抗體 C11orf71

11號染色體開放閱讀框74抗體 C11orf74

12號染色體開放閱讀框4抗體 C12ORF4

12號染色體開放閱讀框24抗體 C12ORF24

CD30抗體 CD153

細胞角蛋白19，17，14，42，10抗體 Cytokeratin 10+14+17+19+42

環核苷酸門控陽離子通道蛋白CNG-1β抗體 CNGB1

細胞角蛋白10抗體 CK10/Cytokeratin 10

亮氨酰氨基肽酶(LAP)重組蛋白大鼠藍微褐鏈霉菌 Streptomyces cyaneofuscatus黃直絲鏈霉菌 Streptomyces flavorectus

小鼠骨髓瘤細胞小鼠成纖維細胞

酒假絲酵母 Candida kefyrA2780(人卵巢細胞)

人淋巴成纖維細胞培養基植物桿菌 Lactobacillus plantarum

絲蓋小苞腳菇 Volvariella bombycina脈孢菌 Neurospora sp.

溶藻弧菌 Vibrio alginolyticus6-10B, 人鼻咽細胞系

卵巢釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細胞白血病細胞)球孢白僵菌 Beauveria bassiana

尖孢鐮刀菌棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectummyc標簽免疫親和介質

大鼠腸上皮細胞培養基日本根霉 Rhizopus japonicus

厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia異型德克酵母 Dekkera anomala

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MDA-MB-468(人腺細胞)運動發酵單胞菌 Zymomonas mobilis