小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa試劑盒實驗方法     英文名稱：Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA Kit       檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa試劑盒實驗方法一、標本要求 
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa試劑盒實驗方法二、注意事項
1.  此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時內(nèi)進行實驗，標本可存放于2～8℃。不需及時實驗，標本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標示。
三、實驗前準備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。
2．準備各種實驗儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa試劑盒實驗方法操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

根瘤菌 Rhizobium sp.

珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia corallina

人原髓細胞白血病細胞英文名稱：HL-60

香菇 Lentinula edodes

Raji(人Burkitt's淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠胰島細胞*培養(yǎng)基100mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

大豆慢生根瘤菌

膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

STO(小鼠胚成纖維細胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

kasumi-1, 人白血病細胞株 Human

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

PK-15(豬腎細胞)5×106cells/瓶×2

宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.

人子宮平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL

人腺上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

根瘤菌 Rhizobium sp.

地衣芽胞桿菌 Bacillus licheniformis

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

溶藻弧菌 Vibrio alginolyticus

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

Hanks’ Balanced Salt Solution (with Ca2+& Mg2+)規(guī)格：500ml COX Inhibitor Screening Assay Hydrochloric Acid （1 ea）Hydrochloric Acid； COX Inhibitor Screening Assay Hydrochloric Acid

H-PGDS （human recombinant） FP Assay Reagent （1 ea）H-PGDS （human recombinant）； H-PGDS （human recombinant） FP Assay Reagent

Tris-Borate EDTA Stock Solution （5X， pH 8。0） （500 mL）TBE Buffer； Tris-Borate EDTA Stock Solution （5X， pH 8。0）

2-O-methyl PAF C-18 （100 mg）3，5，9-trioxa-4-phosphaheptacosan-1-aminium， 4-hydroxy-7R-methoxy-N，N，N-trimethyl-4-oxide； ET-18-OCH3|Edelfosine|1-O-octadecyl-2-O-methyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine； 2-O-methyl PAF C-18

N，N-Dimethylsphingosine （50 mg）2S-（dimethylamino）-4E-octadecene-1，3R-diol； N，N-Dimethylsphingosine

Methyltransferase Enzyme Mixture （1 ea）MT Enzyme Mixture； Methyltransferase Enzyme Mixture

LSD DMSO （2 ml）LSD DMSO

Tacrine （hydrochloride） （5 g）1，2，3，4-tetrahydro-9-acridinamine， monohydrochloride； Cognex|Romotal； Tacrine （hydrochloride）

Aconitase Ferrous Ammonium Sulfate （1 ea）Ferrous Ammonium Sulfate； Aconitase Ferrous Ammonium Sulfate

BADGE （500 g）2，2’-[（1-methylethylidene）bis（4，1-phenyleneoxymethylene）]bis-oxirane； Bisphenol A diglycidyl ether； BADGE

Mn（III）TBAP （100 mg）Mn（III）tetrakis（4-benzoic acid） porphyrin chloride； Mn（III）TBAP

小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa試劑盒實驗方法6，7-Dimethyltetrahydropterin （hydrochloride） （500 mg）2-amino-5，6，7，8-tetrahydro-cis-6，7-dimethyl-4（1H）-pteridinone， hydrochloride； 6，7-Dimethyltetrahydropterin （hydrochloride）

FK-409 （1 mg）4-ethyl-2E-（hydroxyimino）-5-nitro-3E-hexenamide； NOR-3； FK-409

7（Z），11（Z）-Nonacosadiene （50 mg）（7Z，11Z）-nonacosadiene； 7（Z），11（Z）-Nonacosadiene